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LAK,IL-2,放射線との併用によるヒト唾液腺癌細胞の骨芽細胞への分化誘導

LAK、IL-2 和放射组合诱导人唾液腺癌细胞分化为成骨细胞

基本信息

批准号：
12877327
负责人：
佐藤光信
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877327/
关键词：
LAK IL-2 放射線唾液腺癌細胞骨芽細胞分化誘導

项目摘要

1.ヒト唾液腺癌細胞(HSG-AZA3)をヌードマウスに移植して、HSG-AZA3ヌードマウス腫瘍を調製した。この腫瘍にヒトLAK細胞とヒト・リコンビナントIL-2(hrIL-2)を連日投与し、更にX線(3-10Gy)1回照射を併用して、抗腫瘍効果を検討して以下の結果を得た。なお、ヒトLAK細胞は、ヒト末梢血より分離したリンパ球をhrIL-2で処理して調製した。(1)治療した腫瘍組織内に骨様組織の存在が、HE染色、von Kossa染色により検出された。また、骨様組織の周囲に近接して存在する腫瘍細胞に、オステオポンチン、オステオネクチン及びCbfa1の発現を凍結切片を用いたin situ hybridization及びNorthern blottingにより検出した。更に、アルカリフォスファターゼとI型コラーゲンの発現が蛍光抗体法により検出された。(2)骨様組織を含む腫瘍組織では、骨シアロプロテインmBNAの発現が、nested-polymerase chain reaction (nested-PCR)により検出された。2.diffusion chamber内に、HSG-AZA3細胞のみを注入し、10^5単位/mlのhrIL-2,または、LAK細胞のみを含む培養液で10日間in vitroで培養した。その間、適宜X線照射(10Gy)を1回施行した。その後、ヌードマウス腹腔内に移植し、6週後に摘出して、HSG-AZA3細胞の変化について検索して以下の結果を得た。(1)HSG-AZA3細胞の骨芽細胞への変換の惹起されていることを、HE染色、Von Kossa染色により、またin situ hybridizationによるオステオポンチン、オステオネクチンmRNAの発現の検出により、明らかにした。

1. HSG-AZA 3 cells were transplanted and modulated. The anti-tumor effect of LAK cells treated with IL-2(hrIL-2) was investigated by daily irradiation and X-ray (3-10Gy) irradiation. LAK cells were isolated from peripheral blood and treated with IL-2. (1)The presence of bone tissue, HE staining and von Kossa staining in the treated tumor tissue were detected. In addition, the presence of tumor cells in the surrounding tissue of bone was detected by frozen sections of tissue hybridization and Northern blotting. In addition, the development of anti-virus antibody method (2)Bone tissue contains tumor tissue, bone marrow, mBNA, nested-polymerase chain reaction (nested-PCR), and is detected by PCR. 2. HSG-AZA3 cells were injected into diffusion chamber at 10^5 units/ml of hrIL-2 and LAK cells were cultured in vitro for 10 days. For a period of time, suitable X-ray irradiation (10Gy) is performed once. After transplantation, HSG-AZA3 cells were harvested 6 weeks later. The following results were obtained. (1) Induction of bone bud cell transformation in HSG-AZA3 cells by HE staining, Von Kossa staining, in situ hybridization, in situ hybridization, in situ hybridization.