ヒト唾液腺の癌細胞におけるベスナリノンの抗腫瘍活性

维纳里酮对人唾液腺癌细胞的抗肿瘤活性

• 批准号: 08266243
• 负责人: 佐藤 光信
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266243/
• 关键词: ヒト唾液腺癌細胞; ベスナリノン; 抗腫瘍活性; p21^<WAF1>; TGF-β1; TSC-22

ヒト唾液腺癌細胞(TYS)を、新規の細胞分化・アポトーシス誘導剤であるベスナリノン(3,4-dihydro-6-[4-(3,4-dimethoxybenzoyl)-1-piperazinyl]-2(1H)-quinolinone)で処理して認められる抗腫瘍効果を解析し、以下の諸点を明らかにした。(1)TYS細胞のp53は、コドン281^<Aep-Hs>で点変異の生じていることをPCR-SSCPとdirect DNA sequencingにより明らかにした。(2)TYS細胞をベスナリノンで処理すると、腺房細胞への分化とアポトーシスが生じ著明な抗腫瘍活性が認められ、それに伴って、p21^<WAFI>とTGF-β1との発現がup-regulationされることをNorthem blottingとimmunoblottingにより検出した。(3)TYS細胞において、ベスナリノンによるp21^<WAF1>の発現誘導は、シクロヘキシミドで阻害されないことより、ベスナリノンは直接的にP21^<WAF1>を誘導していることが示唆された。また、TGF-β1でTYS細胞を処理するとp21^<WAF1>の発現誘導が認められた。(4)TYS細胞のベスナリノン処理により、培地へのlatent TGF-β1の産生の増強がELISAにより検出された。(5)TYS細胞において、TGF-βレセプター(I.II,III)の発現がaffinity cross-linkingにより検出された。(6)ベスナリノンで処理したTYS細胞において、増殖抑制に伴い発現誘導される遺伝子として、TSC-22遺伝子のヒトホモローグのcDNA断片を得た。更に、そのcDNAの完全長をクローニングし全塩基配列を決定した。すなわち、ベスナリノン処理TYS細胞より、anti-sense oriented cDNA libraryを構築し、このcDNA libraryにより形質転換された大腸菌XLOLR株のコロニーをランダムに選択し、アルカリ法によりphagemidを調製した。更に、ジデオキシ法によりcDNA断片の一部の塩基配列を決定し、ホモロジー検索を行った。ランダムシークエンスで得られたヒトTSC-22 cDNAは1313bpでopen reading frame(ORF)を完全には含んでいなかった。そこで、phagemid libraryを用いて5'-RACE変法によりヒトTSC-22完全長cDNAをクローニングした。

Salivary adenocarcinoma cell (TYS), new regulation, cell differentiation, differentiation and differentiation of salivary adenocarcinoma (1) TYS

项目成果

Masayuki Azuma: "Increased matrix metalloproteinase-2 activity induced by TGF-β1 induct cells of human salivary gland is associated with the development of cyst formation in vivo" J Oral Pathol Med.25. 467-473 (1996)

Masayuki Azuma：“人唾液腺 TGF-β1 诱导细胞诱导的基质金属蛋白酶 2 活性增加与体内囊肿形成的发展有关”J Oral Pathol Med.25 (1996)。

Masayuki Azuma: "Different signaling pathways involved in transforming growth factor-β1-indueed morehologic change and type IV collagen systhesis in SV40-immortalited normal human salivary gland duct and myoepithelial cell clones." Arch.Oral.Biol.4. 413-4

Masayuki Azuma：“不同的信号通路参与转化生长因子-β1 引起的形态变化和 SV40 永生化正常人唾液腺管和肌上皮细胞克隆中的 IV 型胶原合成。”Arch.Oral.Biol.4。

Mitsunobu Sato: "Emergence of osteoblast-like cells in a neoplastic human salivar cancer cell line after treatment with 22-oxa-1α,25-dihydroxyvitam" Cancer Letters. (in press). (1997)

Mitsunobu Sato：“用 22-oxa-1α,25-二羟基维生素治疗后，人类唾液癌细胞系中成骨细胞样细胞的出现”《癌症快报》（1997 年出版）。

Masayuki Azuma: "Expression of integrin subunits in normal.and malignant human salivary gland cell colnes and its requlation by transforming growth factor-β1." Cancer Letters. 109. 91-99 (1996)

Masayuki Azuma：“整合素亚基在正常和恶性人类唾液腺细胞中的表达及其通过转化生长因子-β1 的调节。” 109. 91-99 (1996)。

Mitsunobu Sato: "Induction of tumor differentiation and apoptosis,and Le^Y antige expression in treatment with differentiation-inducing agent,vesnarinone,of a patient with salivary adenoid cystic carcinoma" APOPTOSIS. (in press). (1997)

Mitsunobu Sato：“用分化诱导剂维纳里酮治疗唾液腺腺样囊性癌患者时诱导肿瘤分化和细胞凋亡以及 Le^Y 抗原表达”细胞凋亡。