逆行性神経伝達を担う脳内カンナビノイド系の作用機構とその生理的意義

负责逆行神经传递的脑大麻素系统的作用机制及其生理意义

• 批准号: 02J02937
• 负责人: 前島 隆司
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J02937/
• 关键词: 小脳; プルキンエ細胞; 登上線維; 逆行性シグナル伝達; 内因性カンナビノイド; カンナビノイド受容体; 代謝型グルタミン酸受容体; ホスホリパーゼCβ

脳には、マリファナに含まれる活性物質の標的となるカンナビノイド受容体とそのリガンド(内因性カンナビノイド)が存在する。内因性カンナビノイドは神経細胞から放出され、入力線維のシナプス終末に存在するカンナビノイド受容体を活性化して神経伝達物質の放出を抑制することが知られている。小脳プルキンエ細胞でも、細胞内カルシウム濃度上昇もしくは代謝型グルタミン酸受容体1型(mGluR1)の活性化を引き金に内因性カンナビノイドが放出され、シナプス前抑制を生じる。また、カルシウム上昇とmGluR1活性化の相互作用により抑制効果が高まることも報告されている。これまでに内因性カンナビノイドの合成経路は生化学的実験法を用いて研究され、ホスホリパーゼCの関与が示されていた。しかし、細胞特異的解析の困難やサブタイプ特異的阻害剤の欠如のためより詳しい解析がなされていなかった。プルキンエ細胞ではmGluR1から3量体GタンパクGq/11、ホスホリパーゼCβ4(PLCβ4)に至るシグナル伝達経路の存在が知られている。そこでこのシグナル経路が内因性カンナビノイド合成に関与するか検討するため、電気生理学的手法を用いPLCβ4遺伝子欠損マウスを解析した。生後約2週齢のマウスから摘出した小脳の薄切片標本を用いた。プルキンエ細胞よりホールセル記録を行い、登上線維刺激で生じる興奮性シナプス後電流(CF-EPSC)を計測した。正常マウスでは、プルキンエ細胞を脱分極して細胞内カルシウム上昇を起こすと一過性にCF-EPSCが減弱した。さらにmGluR1のアゴニストDHPGを投与した時には同じ脱分極でより強いCF-EPSCの減弱がみられた。一方、PLCβ4欠損マウスではDHPGの増強効果がほとんど失われていた。以上から、内因性カンナビノイドの合成経路にPLCβ4が介在し、脱分極による逆行性シグナル伝達を調節していると推測された。

脳 に は, マ リ フ ァ ナ に containing ま れ る active substances の mark と な る カ ン ナ ビ ノ イ ド by let body と そ の リ ガ ン ド (endogenous カ ン ナ ビ ノ イ ド) exist が す る. Endogenous カ ン ナ ビ ノ イ ド は god 経 cells か ら release さ れ, into the line of force d の シ ナ プ ス terminal に exist す る カ ン ナ ビ ノ イ ド by let body を activeness し て god 経 の 伝 of material released を control す る こ と が know ら れ て い る. Small 脳 プ ル キ ン エ cells で も, intracellular カ ル シ ウ ム concentration rising も し く は metabolic type グ ル タ ミ ン acid by let body type 1 (mGluR1) の activeness を lead き gold に endogenous カ ン ナ ビ ノ イ ド が release さ れ, シ ナ プ ス inhibit を born before じ る. Rising ま た, カ ル シ ウ ム と mGluR1 activeness の interaction に よ り inhibition of unseen high が ま る こ と も report さ れ て い る. こ れ ま で に endogenous カ ン ナ ビ ノ イ ド の は biochemical synthesis 経 road be を 験 method with い て research さ れ, ホ ス ホ リ パ ー ゼ C の masato and が shown さ れ て い た. し か し, cell specific analytical の difficult や サ ブ タ イ プ specific resistance against tonic の owe such as の た め よ り detailed し い parsing が な さ れ て い な か っ た. プ ル キ ン エ cells で は mGluR1 か ら quantity body 3 G タ ン パ ク Gq / 11, ホ ス ホ リ パ ー ゼ C beta 4 beta 4 (PLC) に to る シ グ ナ ル 伝 da 経 road の exist が ら れ て い る. そ こ で こ の シ グ ナ ル 経 road が endogenous カ ン ナ ビ ノ イ ド synthetic に masato and す る か beg す 検 る た め, electricity 気 gimmick を use い PLC beta 4 of physiology 伝 son owe loss マ ウ ス を parsing し た. About 2 weeks after birth, 齢 齢 ウス ウス ら ら ら the <s:1> た small 脳 <s:1> thin slice specimens were picked and を were used for た た. プ ル キ ン エ cells よ り ホ ー ル セ ル record を い, born on line d stimulation で じ る excitatory シ ナ プ ス (CF - EPSC) after the current を measuring し た. Normal マ ウ ス で は, プ ル キ ン エ cell を points off most し て in cells カ ル シ ウ ム rise since を こ す と transient に CF - EPSC が abate し た. さ ら に mGluR1 の ア ゴ ニ ス ト DHPG を cast with し た when に は じ points off with extremely で よ り strong い CF - EPSC の abate が み ら れ た. On one side, the PLCβ4 is in short supply and ウスで ウスで, while the <s:1> enhancement effect of DHPG is lost and がほとん た た. Above か ら, endogenous カ ン ナ ビ ノ イ ド synthetic 経 の way に PLC beta 4 が medium in し, polarization に よ る retrograde シ グ ナ ル 伝 da を adjust し て い る と speculation さ れ た.

项目成果

M.Kano: "Endocannabinoid-Mediated Modulation of Excitatory and Inhibitory Synaptic Transmission, In Excitatory-Inhibitory Balance : Synapses, Circuits, Systems(T.K.Hensch and M.Fagiolini (edit.))"Kluwer Academic/Plenum Publishers. 11 (2003)

M.Kano：“兴奋性和抑制性平衡中的兴奋性和抑制性突触传递的内源性大麻素介导的调节：突触、电路、系统（T.K.Hensch 和 M.Fagiolini（编辑））”Kluwer 学术/全会出版社。

少作隆子: "カンナビノイド受容体"Annual Review 神経 2003. 18-24 (2003)

Takako Shosaku：“大麻素受体”神经病学年度评论 2003. 18-24 (2003)

M.Kano: "Retrograde Modulation of Synaptic Transmission Mediated by Endogenous Cannabinoids"Current Neuropharmacology. 2. 49-57 (2004)

M.Kano：“内源性大麻素介导的突触传递的逆行调节”当前神经药理学。

M.Kano: "Retrograde signaling at central synapses via endogenous cannabinoids"Mol.Psychiatry. 7・3. 234-235 (2002)

M.Kano：“内源性大麻素在中枢突触中的逆行信号传导”Mol.Psychiatry 234-235（2002）。