ヒトドーパミントランスポーターの多型の生理的意義と個体における機能の解析

人多巴胺转运蛋白多态性的生理意义及其在个体中的功能分析

• 批准号: 02J03465
• 负责人: 福家 聡
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J03465/
• 关键词: dopamine transporter; polymorphism; VNTR; hesr1; bHLH; reporter assay; SNP; gene expression; yeast one-hybrid system; Hesr1; genome

前年度までに、DAT1遺伝子のVNTR多型は、反復回数によってレポーター遺伝子の発現に差があることと、この差が3'非翻訳領域依存的な遺伝子発現抑制の影響を受けることが解った。またVNTR多型近傍領域に作用する因子としてbHLH型の転写因子HESR1がDAT1遺伝子発現に関わることをルシフェラーゼレポーターアッセイにより示した。今年度においては、まずRNAiを用いたhesr1遺伝子特異的ノックダウンにより、SH-SY5Y細胞において見られたDAT1遺伝子3'非翻訳領域依存的な遺伝子発現抑が緩和されることを示した。また、HEK293細胞においてHESR1は内在性のDAT1遺伝子発現を抑制することを示した。HESR1によるDAT1遺伝子発現調節が直接的な結合によるものかどうかを検討するために、ゲルシフトアッセイを行ったところ、HESR1はDAT1遺伝子VNTR多型近傍領域に直接結合することが解った。加えて、NCBIデータベースを元に、ヒトhesr1遺伝子に存在し、DNA結合に重要なbHLHドメインのロイシンをメチオニンに置換するSNP候補C386Aに注目し、機能解析を行ったところC386A変異体はDAT1遺伝子発現抑制活性を失うことをレポーターアッセイにより示した。この活性の違いはDNA結合能を失ったことによるものであることをゲルシフトアッセイにより示し、これはホモ二量体形成能を減少させているためであることをYeast two-hybridにより示した。以上のことからヒトhesr1遺伝子SNP候補C386AはDAT1遺伝子が関わる多因子性表現型のリスクファクターである可能性を示唆した。

In the previous year, the number of people with VNTR polymorphism, the number of responses, the number of errors, the number of VNTR polymorphisms in the previous year, the number of people in the previous year. The effect of VNTR polymorphisms in the near domain is related to the factor

项目成果

Shoichi Ishiura, Satoshi Suo, Mai Sugiura, Satoshi_Fuke, Noboru Sasagawa: "Cloning and characterization of C.elegans dopamine receptors."2004年 国立遺伝学研究所研究会「動物行動の遺伝学:モノアミンと行動制御」.

Shoichi Ishiura、Satoshi Suo、Mai Sugiura、Satoshi_Fuke、Noboru Sasakawa：“线虫多巴胺受体的克隆和表征。”2004 年国家遗传学研究所研究小组“动物行为遗传学：单胺和行为控制”。

ヒトの行動や疾患に影響を与えるドーパミン関連遺伝子と多型

影响人类行为和疾病的多巴胺相关基因和多态性

• 发表时间: 2004
• 期刊: 第6回日本進化学会大会
• 作者: 福家 聡;笹川 昇;石浦 章一
• 通讯作者: 石浦 章一

福家 聡, 杉浦 真依, 石浦 章一: "ヒトドーパミントランスポーター(DAT)遺伝子のVNTR多型が遺伝子発現に与える影響"第26回日本分子生物学会年会.

Satoshi Fukuya、Mayi Sugiura、Shoichi Ishiura：“人类多巴胺转运蛋白（DAT）基因的 VNTR 多态性对基因表达的影响”第 26 届日本分子生物学会年会。

ドーパミン機能に関わる遺伝子多型

与多巴胺功能相关的基因多态性

• 发表时间: 2004
• 期刊: 細胞工学 23・8
• 作者: 石浦 章一;福家 聡
• 通讯作者: 福家 聡

杉浦 真依, 周防 諭, 福家 聡, 笹川 昇, 石浦 章一: "線虫C.elegansにおけるドーパミン受容体の同定"第26回日本分子生物学会年会.

Mai Sugiura、Satoshi Suo、Satoshi Fukuie、Noboru Sasakawa、Shoichi Ishiura：“线虫中多巴胺受体的鉴定”。日本分子生物学会第 26 届年会。