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染色体DNA複製開始機構の制御-リン酸化によるMCM複合体の活性化と不活性化

控制染色体 DNA 复制起始机制 - 通过磷酸化激活和失活 MCM 复合物

基本信息

批准号：
15770092
负责人：
高井裕子
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞は一回の細胞周期で一度きりの正確なゲノム複製を行う。そのゲノム複製の制御に関与する因子のうち、Mcm(minichromosome maintenance)蛋白質群は特に重要な役割を果たしている。Mcmは6個[Mcm2-7]の構造的に類似したタンパク質からなる複合体で、ライセンス因子の本体であり、複製開始に必須である。我々はMcm蛋白質の生化学的な解析を行い、Mcm複合体を構成する6種類のサブユニットの中で、組み換え蛋白質Mcm4/6/7複合体が内在的に二本鎖DNAを巻き戻す機能(DNAヘリカーゼ)、DNA結合能、DNA依存性ATP加水分解能をもつことを明らかにした(You et al.MCB 1999)。また、Mcm4/6/7ヘリカーゼの変異体解析から、Mcm4とMcm6のATP結合ドメインはそれぞれDNA結合およびATP結合に関与すること、Mcm7のATP結合ドメインはMcm4/6/7ヘリカーゼ活性に必須であること、およびMcm4のZinc-fingerは安定なMcm4/6/7六量体の形成に関与することを明らかにし報告した(You et al.JBC 2002)。さらに、Mcm4/6/7ヘリカーゼがTの連続配列により特異的に活性化されることを見出した。DNA複製開始部位には多くの場合、AT-richな配列が存在することが示唆された。この結果から、我々は、T-rich配列によるMCMヘリカーゼの活性化が、複製開始領域を決定するという仮説を提出した(You et al.EMBO J.2003)。すなわち、Mcm4/6/7複合体は二量体として複製起点領域に選択的に結合し、複製フォークで効率よいヘリカーゼとして二本鎖DNAの巻き戻しを行なう可能性を示唆する。本年度は、複製開始領域をmimicするバブル構造において、Mcm4/6/7複合体はダブルヘキサマーとして左右対称に両分岐点の5'側に隣接している25ヌクレオチドの一本鎖領域に結合することを明らかにした。片方strandのチミン残基を欠損するとDNA unwinding効力はかなり減少されることから、double-hexameric Mcm4/6/7が同時双方向にフォークを効率的に解くことを示した。また、ヘリカーゼ活性が3' tailのチミンの含量に関与し、最大のレベルは50%以上のチミンがあることによって達成されます。さらに、活性化されたMcm4/6/7複合体のヘリカーゼ活性がGC-richな二本鎖DNAによって阻害されることを見出した。現在論文を投稿中である。

It is correct to copy the cell cycle at one time. The production of Mcm (minichromosome maintenance) protein group is very important, and it is very important. The types created by Mcm's 6 [Mcm2-7] models are similar to the replication complex, the replication factor, and the copy must be deleted. We analyzed the biochemical analysis of Mcm protein, the Mcm complex was transformed into the same class of DNA Mcm4/6/7 complex, and the internal DNA binding capacity of DNA protein complex, DNA binding energy, DNA-dependent ATP plus water decomposition were analyzed and analyzed (You et al.MCB 1999). The combination of Mcm4/6/7 and ATP, the combination of Mcm4Mcm6 and McM6, the combination of Mcm4Mcm6 and Mcm4Mcm6, the combination of Mcm7 and ATP, the combination of Mcm4Mcm6 and Mcm4Mcm6, the combination of Mcm4Mcm6 and Mcm Mcm4 Zinc-finger validate Mcm4/6/ 7 hexagonal volume to form a report report (You et al.JBC 2002). The activation of the device, the activation of the Mcm4/6/7, the output of the link, and the activation of the device are assigned to it. At the beginning of the DNA copy, there are multiple failures, and there are errors in the AT-rich configuration to indicate an error. The results of this paper are as follows: results, we and T-rich are assigned to make the MCM information more active, and the copy starts to determine how to improve the performance of the system (You et al.EMBO J.2003). The combination and replication rates selected in the field of binary replication and Mcm4/6/7 replication show that there is a possibility of failure in an ordinary university, such as the DNA university. At the beginning of this year, we have started the field mimic information system and Mcm4/6/7 complex system, which is called the bifurcation point at the right and the right. This book will be connected to the 25-year-old database in the field. On the side of the strand, the residue is not suitable for DNA unwinding, and the double-hexameric Mcm4/6/7 is responsible for the resolution of the error rate of both sides. Temperature, temperature, Activation, activation, Mcm4/6/7 complex, activity, GC-rich, DNA, block, block, kill, block, activate, activate, activate. I am now in the process of submitting articles to the article.