ニューカッスル病ウイルス及びトリインフルエンザウイルスの迅速診断法・制御法の開発

新城疫病毒和禽流感病毒快速诊断和控制方法的建立

• 批准号: 06F06224
• 负责人: 大橋 和彦
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06F06224/
• 关键词: ニューカッスル病; LAMP法

ニューカッスル病(ND)は、NDウイルス(NDV)の感染により起こる鶏の急性感染症であり、養鶏産業に甚大な損害を与える。NDは生および不活化ワクチン接種で予防されているが、現在でも世界各地で発生が報告されており、発生時には迅速な診断や病原型の決定が重要となってくる。そこで本研究では、これまで日本各地で種々の鳥類から分離されたNDV株の遺伝子解析を行い、分離時期、鳥類種、あるいは分離場所などと遺伝子型の相関を解析し、さらに新規診断法の開発を目的として、LAMP法やPCR法など迅速診断法として有用な方法を検討した。昨年度は、過去に日本国内で分離されたNDV株のM遺伝子の塩基配列を元に系統樹解析を行い、1970年代以前の分離株と1980年代以降の分離株の2つのグループに分かれることが示した。またF遺伝子を標的としたLAMP法を樹立してND迅速診断への応用を詳細に検討した。その結果、日本で分離されているNDV38株全てでF遺伝子を検出し、NDV診断法として応用可能であることを示した。今年度は、NDVに抗ウイルス効果を示す物質を探索するシステムを樹立するため、日本国内で分離されたNDV株のF遺伝子の塩基配列を解析して、その中でもF蛋白の機能に重要なcoiled-coil motif部分の構造を詳細に解析した。その結果、強毒株と弱毒株で異なるアミノ酸置換がF蛋白の構造に影響を与えることが予想された(コンピューターによる解析、BioEdit program等を使用)。今後、培養細胞を用いたF蛋白の機能を解析することで、この方法の有用性を証明することが必要である。また他のウイルス蛋白(P蛋白など)にも応用する予定である。

The infection of ND, ND and NDV causes acute infection and damages to the nutrition industry. ND is now reported worldwide for its development, rapid diagnosis, and prototype determination. In this study, we investigated the genetic analysis of NDV strains isolated from bird species in Japan, isolation period, bird species, isolation site, genetic type correlation, development purpose of new diagnostic methods, LAMP method, PCR method, rapid diagnostic method, and useful methods. Phylogenetic tree analysis of NDV strains isolated in Japan in the past year, isolates isolated before 1970 s and descending isolates from 1980 s were performed. The LAMP method is used to establish a rapid diagnosis system. The results showed that NDV 38 strains were isolated from Japan, and NDV diagnosis method was possible. This year, NDV strain F gene sequence was analyzed in detail, and the structure of coiled-coil motif, which is important for the function of F protein, was analyzed in detail. The results, virulent strains and attenuated strains are different from each other. Acid substitutions affect the structure of F protein. In the future, it is necessary to analyze the function of F protein in cultured cells and prove the usefulness of this method. Other proteins (P proteins) are used for pre-defined purposes.