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マレック病腫瘍化におけるアポトーシス関連及び癌抑制遺伝子の発現動態の解析

马立克氏病肿瘤发生过程中凋亡相关基因和抑癌基因的表达动态分析

基本信息

批准号：
09760262
负责人：
大橋和彦
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760262/
关键词：
マレック病アポトーシス bcl-2

项目摘要

マレック病ウイルス(MDV)の腫瘍化における発癌抑制遺伝子やアポトーシス関連遺伝子の役割を解析するため、特にbcl-2、bcl-x遺伝子に関して検討した。そしてこれまで、1)マレック病腫瘍株化細胞、MSB1、MTB1やMDV感染鶏由来CD4^+T細胞においてはアポトーシス抑制遺伝子であるbcl-2遺伝子の発現が抑制されていること、2)しかしbcl-2同様にアポトーシスを抑制するbcl-xLが代償的にMSB1.MTB1では発現していることが判明した。これらのことはMDVによる腫瘍化(少なくとも腫瘍化の維持)にはbcl-2よりもbcl-xL遺伝子の発現がより大きく寄与していることを示唆している。しかしながら、可移植性マレック病腫瘍株化細胞、RP1、HP1等ではbcl-2遺伝子の発現が認められ、bcl-2遺伝子が腫瘍の悪性化(腫瘍株の可移植性を指標として)に関与していることも示唆された。そこでbcl-2遺伝子の可移植性に対する役割を検討した。PCR法にて鶏bcl-2α遺伝子cDNAをクローニングし、ネオマイシン耐性マーカーを持つ真核細胞発現ベクター(pCIneo)に組み込み、bcl-2遺伝子を発現していないMSB1細胞に遺伝子導入してbcl-2遺伝子発現MSB1細胞を樹立した。bcl-2遺伝子の発現はノーザンブロット法にて確認した。そして現在、この細胞をマレック病感受性鶏の翼下皮下に接種して可移植性が付与するかどうかを検討している。さらにMDV感染鶏由来CD4^*T細胞における他のアポトーシス関連遺伝子、DAD1、ITA、p58等の発現をノーザンブロット法で検討したが、対照鶏との間に有意な差は認められなかった。今後さらに腫瘍株化細胞における発現を検討する。

The analysis of tumor suppressor gene, bcl-2 and bcl-x gene in MDV 1) MDV infection in infected cells, MSB1, MTB1 and CD4^+T cells is inhibited by bcl-2 gene expression, 2) bcl-2 gene expression is inhibited by bcl-2 gene expression, MTB1 is compensated by bcl-2 gene expression, MTB1 is inhibited by bcl-2 gene expression. The development of bcl-2 and bcl-xL genes is a major problem in the development of MDV. The expression of bcl-2 gene was detected by PCR, and the expression of bcl-2 gene was detected by PCR, and the expression of bcl-2 gene was detected by PCR. The portability of bcl-2 gene is discussed in this paper. PCR was used to detect bcl-2α gene cDNA, gene expression, gene tolerance and gene expression in eukaryotic cells. bcl-2 gene discovery is confirmed by a method called "DNA sequencing." Subcutaneous inoculation under the wing of the infected cells and transplantability MDV infection is caused by CD4^*T cells, and other miscell-related genes, DAD1, ITA, p58, etc., are detected and identified by the detection method. In the future, we will discuss the development of cell culture.