新規NF-κB制御因子IκB-ζの刺激特異的発現誘導機構とその生理学的意義の解明

阐明新型NF-κB调节因子IκB-ζ的刺激特异性表达诱导机制及其生理意义

• 批准号: 18770112
• 负责人: 山崎 創
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770112/
• 关键词: NF-κB; 炎症; 遺伝子発現

申請者は以前、核内に存在する誘導性の転写調節因子IκB-ζを新規にクローニングし報告した。IκB-ζは、炎症性の刺激に応答して発現が誘導され、核内でNF-κBと相互作用してその標的遺伝子の発現を正に制御する。しかし、IκB-ζの誘導がNF-κBに依存するため、これまでNF-κBの阻害実験などによりIκB-ζを介した転写誘導の分子機構の詳細を検討することが困難であった。そこで本年度申請者は、IκB-ζを炎症性刺激とは独立に発現誘導する系を構築し、解析を進めた。亜鉛刺激に応答するプロモーターによるIκB-ζの誘導と、IκB-ζを誘導しない炎症性刺激であるTNF-αによる細胞の活性化は、いずれもそれだけではIκB-ζの標的遺伝子の誘導を惹起することはできないが、これらを組み合わせることにより誘導された。まず、タンパク質合成阻害剤を用いた実験により、IκB-ζの標的遺伝子の発現には新規タンパク質合成が必要であることが知られていたが、亜鉛刺激により予めIκB-ζの発現を誘導しておけば、TNF-α刺激の際に新規タンパク質の合成は不要であったので、標的遺伝子の発現誘導に必要な一次応答性の遺伝子はIκB-ζだけであることが判明した。また、この解析の過程で、タンパク質合成阻害剤が一次応答性遺伝子のmRNAの発現が増強されることがわかった。この分子機構は転写の増強ではなくmRNAの安定化であることを示し、論文として報告した。さらに、阻害因子やsiRNAの発現実験により、IκB-ζの標的遺伝子の発現誘導には、NF-κBのほか、炎症性転写因子であるC/EBPタンパク質も必要であることを示した。また、クロマチン免疫沈降実験により、IκB-ζは、NF-κBなどの炎症性転写調節因子が標的プロモーターに結合するのに必要であることを示した。

The applicant reported on the presence of inducible regulatory factor IκB-κ in the past and in the nucleus. IκB-κ B response to inflammatory stimuli is induced, and NF-κB interaction with target proteins in the nucleus is prevented. It is difficult to describe the molecular mechanism of NF-κ B induction in detail. This year's applicants have been asked to construct and analyze the system of independent induction of inflammatory stimuli The induction of Iκ B-zeta in response to lead stimulation, the activation of TNF-α cells in response to inflammatory stimulation, and the induction of IκB-zeta target genes in response to lead stimulation. It was found that the production of Iκ B-zeta target gene was necessary for the synthesis of new protein when TNF-α was stimulated, and that the production of IκB-zeta target gene was necessary for the production of new protein when TNF-α was stimulated. The expression of mRNA of primary response gene is enhanced by the inhibitor of protein synthesis during the analysis of protein. The molecular structure of the protein is enhanced by the stabilization of mRNA. In addition, inhibition factors and siRNA production, IκB-zeta target gene production induction, NF-κB production, inflammatory transcription factors, C/EBP gene production and quality control are necessary. In addition, Iκ B-zeta and NF-κB, inflammatory regulatory factors, are necessary to bind to the target molecule for effective immune sedimentation.

项目成果

Crucial roles of binding sites for NF-κB and C/EBPs in IκB-ζ-mediated transcriptional activation

• DOI: 10.1042/bj20061797
• 发表时间: 2007-08-01
• 期刊: BIOCHEMICAL JOURNAL
• 影响因子: 4.1
• 作者: Matsuo, Susumu;Yamazaki, Soh;Muta, Tatsushi
• 通讯作者: Muta, Tatsushi

Control of canonical NF-κB activation through the NIK-IKK complex pathway

• DOI: 10.1073/pnas.0707959105
• 发表时间: 2008-03-04
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Zarnegar, Brian;Yamazaki, Soh;Cheng, Genhong
• 通讯作者: Cheng, Genhong

Protein synthesis inhibitors enhance the expression of mRNAs for enrly inducible inflammatory genes via mRNA stabilization

蛋白质合成抑制剂通过 mRNA 稳定增强可诱导炎症基因的 mRNA 表达

• 发表时间: 2008
• 期刊: Biochim. Biphys. Acta. 1779
• 作者: Yamazaki.;S.・Takeshige;K.
• 通讯作者: K.