アンチセンス遺伝子Tsixによるクロマチン構造初期化の研究

反义基因Tsix对染色质结构重编程的研究

• 批准号: 18780250
• 负责人: 柴田 進和
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18780250/
• 关键词: X染色体不活性化; エピジェネティックス; ヒストンメチル化; アンチセンス遺伝子; Xist; Eed; ポリコーム; クロマチン; Tsix

TsixによるヒストンH3リジン27残基のトリメチル化(H3K27m3)抑制の生物学的な役割を明らかにするために、EedノックアウトES細胞を用いてTsix遺伝子トラップを行いX染色体不活性化に与える影響を調べた。TsixとEedのダブルミュータント雄マウスES細胞では、ES細胞の分化誘導に伴ってXist遺伝子の異常な転写活性化が認められた。TsixあるいはEed単独の変異雄ES細胞ではこのようなXist遺伝子転写活性化は起きないことから、アンチセンス遺伝子Tsixとポリコーム蛋白質Eedが協調的に働いてXist遺伝子の異常な転写活性化を抑制していることが分かった。一般的にEedを含むポリコーム複合体2(PRC2)によるH3K27m3修飾は、Hox遺伝子など発生時期特異的に発現する遺伝子の異所性発現抑制に寄与していることが知られている。Xist遺伝子も雌細胞の不活化X染色体で分化に伴って発現する発生時期特異的遺伝子と考えることができる。今回の我々の結果はアンチセンス遺伝子Tsixの転写がヒストン修飾を妨げてクロマチン構造の変化を抑制し、分化誘導時にXist転写をONにもOFFにも出来る状態を維持するように働いていることを示している。一方でEedは非特異的な転写因子によるXist遺伝子の異所性発現を抑制しているものと考えられた。興味深いことに雌ES細胞ではXist遺伝子プロモータがH3K27m3修飾を受けていてもXist遺伝子の転写誘導が起きることが報告されている。つまりH3K27m3修飾は生理的な遺伝子活性化を妨げず非特異的な異所性発現のみを抑制していると考えられ、これを実現する分子メカニズムの解明が待たれる。

Tsix に よ る ヒ ス ト ン H3 リ ジ ン 27 residues の ト リ メ チ ル change (H3K27m3) inhibiting の biology な "を cut Ming ら か に す る た め に, Eed ノ ッ ク ア ウ ト を ES cells with い て Tsix posthumous son 伝 ト ラ ッ プ を line い X chromosome with activeness に え る influence を adjustable べ た. Tsix と Eed の ダ ブ ル ミ ュ ー タ ン ト male マ ウ ス ES cells で は and ES cell differentiation inducing に の っ て Xist heritage 伝 child abnormal の な planning write activeness が recognize め ら れ た. Tsix あ る い は Eed 単 の alone - different male ES cells で は こ の よ う な Xist heritage 伝 son planning write activeness は up き な い こ と か ら, ア ン チ セ ン ス posthumous son 伝 Tsix と ポ リ コ ー ム protein Eed が coordinated に 働 い て Xist heritage 伝 child abnormal の な planning write activeness を inhibit し て い る こ と が points か っ た. Contains general に Eed を む ポ リ コ ー ム complex 2 (PRC2) に よ る H3K27m3 modified は, Hox but 伝 な ど 発 born period specific に 発 now す る posthumous son 伝 の by different 発 we have pleasure in forwarding you by inhibiting に and し て い る こ と が know ら れ て い る. Xist heritage 伝 も female cells の don't activate the X chromosome に で differentiation with っ て 発 now す る 発 born period specific heritage 伝 son と exam え る こ と が で き る. This return my の 々 の results は ア ン チ セ ン ス heritage 伝 son Tsix の planning write が ヒ ス ト ン modified を hinder げ て ク ロ マ チ ン tectonic の - を inhibit し and differentiation induced に Xist planning write を ON に も OFF に も out る state を maintain す る よ う に 働 い て い る こ と を shown し て い る. Of one party で Eed は nonspecific な planning write factor に よ る Xist heritage 伝 son の different sex 発 を now by inhibiting し て い る も の と exam え ら れ た. Female takes deep い こ と に ES cells で は Xist heritage 伝 son プ ロ モ ー タ が H3K27m3 modified を by け て い て も Xist heritage 伝 son の planning written by inducing が き る こ と が report さ れ て い る. つ ま り H3K27m3 modified は な of physiological 伝 son activeness を hinder げ ず nonspecific 発 な vision of sex is の み を inhibit し て い る と exam え ら れ, こ れ を be presently す る molecular メ カ ニ ズ ム の interpret が stay た れ る.

项目成果

雌マウスntES細胞でのX染色体不活性化

雌性小鼠 ntES 细胞中 X 染色体失活

• 发表时间: 2007
• 作者: S.Shibata;T. Wakayama;T.Yokota;柴田 進和;柴田 進和
• 通讯作者: 柴田 進和

Ectopic Xist Activation in male ES cells with Eed-null and Tsix mutations

具有 Eed-null 和 Tsix 突变的雄性 ES 细胞中的异位 Xist 激活

• 发表时间: 2007
• 作者: S.Shibata;T. Wakayama;T.Yokota;柴田 進和
• 通讯作者: 柴田 進和

Alteration of Histone Tail Modifications in the Xist Locus in Wild-type and Tsix-mutant Male Embryonic Stem Cells during Differentiation.

野生型和 Tsix 突变雄性胚胎干细胞分化过程中 Xist 基因座组蛋白尾部修饰的改变。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Experimental Animals 57
• 作者: S.Shibata;T. Yokota
• 通讯作者: T. Yokota

X-chromosome inactivation in nuclear transfer ES cells.

核移植 ES 细胞中 X 染色体失活。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Cytogenetic and Genome Research (印刷中)
• 作者: S.Shibata;T. Wakayama;T.Yokota
• 通讯作者: T.Yokota