权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

X染色体不活化をモデルとしたES細胞未分化性維持エピジェネティックス制御の研究

以X染色体失活为模型的ES细胞未分化维持的表观遗传调控研究

基本信息

批准号：
16780231
负责人：
柴田進和
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

1.Tsix遺伝子のジーントラップES細胞を用いたXist遺伝子領域のヒストンメチル化修飾の解析:未分化状態のES細胞などと分化した体細胞とでは染色体DNAやヒストン蛋白質の修飾が異なることが知られている。平成16年度には未分化状態特異的なアンチセンス遺伝子の転写が染色体DNAあるいはヒストン蛋白質の修飾変化を引き起こしセンス・パートナー遺伝子の制御を行っている可能性について検討し、Tsix遺伝子トラップ細胞ではXist遺伝子領域のhistone H3 lysine 27残基(H3K27)のトリメチル化修飾が野生型細胞に比較して顕著に増加していることを示した。平成17年度には引き続き分化誘導時のH3K27トリメチル修飾の変化について検討した。その結果、Xist遺伝子座の同修飾は分化が進むとともに減少した。さらに我々はオスES細胞株でも同様のTsix遺伝子トラップ細胞を作成し、メスES細胞株の場合と同じようにH3K27トリメチル化修飾が亢進することを確認した。これらの結果から、未分化細胞特異的にH3K27のトリメチル化修飾を引き起こす活性が存在し、この活性はアンチセンス遺伝子転写によって抑制を受けることが明らかになった。細胞内で多数認められるアンチセンス遺伝子の役割や作用機序については今まで解析が進んでいなかったが、我々の結果はアンチセンス遺伝子がクロマチン構造の制御により他の遺伝子発現を制御している可能性を示唆している(投稿準備中)。2.テトラサイクリンによりTsix発現をコントロール可能なES細胞株およびマウスの作成:平成17年度中に目的のES細胞株の作成に成功したが、細胞レベルの解析ではテトラサイクリンによってTsix遺伝子発現はコントロール出来なかった。テトラサイクリン・トランスアクチベータ遺伝子の発現量が多すぎて細胞毒性が現れたことが原因として考えられた。

1. Analysis of chromosome DNA and protein modifications in ES cells in the undifferentiated state: ES cells in the undifferentiated state: somatic cells in the differentiated state. Heisei 16 years of undifferentiated state of the specific anti-virus gene writing chromosome DNA, anti-virus protein modification of the introduction of anti-virus gene control in the possibility of investigation Tsix gene mutation cells were modified by histone H3 lysine 27 residue (H3K27) in the Xist gene domain, which increased compared with wild-type cells. H3K27-Triton modification and modification of H3K27-Triton As a result, the Xist gene has the same modification as the Xist gene. We confirm that the ES cell line is modified by the same Tsix gene and the ES cell line is modified by the same H3K27 gene The results showed that the activity of H3K27 was inhibited by H3K27 specific gene modification. In the cell, most of the recognized genes are identified in the mechanism of action of the gene. The analysis results show that the possibility of controlling the occurrence of other genes is discussed (in preparation). 2. Tsix gene discovery and development of ES cell line: The ES cell line targeted in the middle of 2007 was successfully developed and analyzed. There are many reasons for the occurrence of cytotoxicity.