活性酸素により生じた変異誘発物質の排除機構

活性氧产生诱变剂的消除机制

• 批准号: 16K07453
• 负责人: 早川 浩
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: Fukuoka Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16K07453/
• 关键词: 活性酸素; 突然変異; 網羅的; 酸化ストレス; 異常タンパク; 酸化ヌクレオチド; 遺伝子; 老化; 癌

ROSあるいは8-oxoGを生じさせないような新たな変異株の網羅的検索：大腸菌内で活性酸素(ROS)あるいは8-oxoGの生成に関わる遺伝子を網羅的に検索するため、ROSあるいは8-oxoG増加によるmutT欠損株の突然変異の上昇が、目的遺伝子の欠損によって抑制されると想定し、その表現型（突然変異）を指標にして変異株を検出する系を構築した。　網羅的欠損株ライブラリーであるKeio clone（3909 clones)を用い、全cloneのmutT geneを１つ１つ、P1 transductionによってCm^r geneに置き換えた二重変異株を作成した。それらの中から自然突然変異頻度がmutT遺伝子欠損導入によっても、なお低い株をリファンピシリン耐性を指標として網羅的に検索した。現在、全部で１４個の変異株を分離できたが、そのうち１０個はenergy metabolism に関与する遺伝子、残り４個は膜構造に関連する遺伝子におちた。　これら14個の遺伝子それぞれについて、現在個別に解析を進めている。その他の研究成果：上記の他にROSにより酸化損傷を受けたRNAに対応する生体防御機構の解析で新たな進展が見られた。8-oxoGを含むRNAオリゴマーをプローブに用い、ヒト細胞抽出液から8-oxoGを特異的に認識し結合する新規のタンパクを同定した。このタンパクは8oxoGを含む１本鎖のRNAおよびDNAオリゴには結合するが、２本鎖DNAには結合しない。また、このタンパクを欠損する変異株は野生株に比べ低濃度の過酸化水素水に対し抵抗性を示した。このことから、このタンパクはアポトーシスを介して、酸化RNA特異的な防御を荷うことが考えられる。

对不产生ROS或8-oxog的新突变体进行详尽的搜索：全面搜索与大肠杆菌中活性氧（ROS）或8-oxog产生的基因相关，我们假设由于静音不足菌株中突变的增加而导致因ROS或8-ox的增加而抑制了使用目标基因和构建的模式的突变（构建突变）的突变（抑制了8-ox的增加）。使用keio克隆（3909克隆）创建了双重突变菌株，该克隆（3909克隆）用P1转导使用CM^r基因代替了所有克隆的每个MUTT基因。其中，由于引入MUTT基因缺乏症而引起的自发突变频率较低的菌株使用利福平蛋白抗性作为指数进行了全面搜索。目前，总共已经分离出14个突变体，其中10种与能量代谢有关，其余4个是与膜结构相关的基因。我们目前正在对这14个基因中的每个基因进行个人分析。其他研究结果：除了上述外，还在分析与ROS氧化损伤的RNA相对应的生物防御机制时还观察到了新的发展。将含有8-oxog的RNA低聚物用作探针，以识别一种新型蛋白质，该蛋白质专门识别并结合了人类细胞提取物的8-oxog。该蛋白与含有8oxog但不与双链DNA的单链RNA和DNA寡聚结合。此外，蛋白质缺陷型突变菌株比野生菌株抗性较低的过氧化氢。这表明该蛋白通过凋亡携带氧化RNA特异性保护。

项目成果

酸化損傷mRNAの代謝に関わる新規因子の探索

寻找参与氧化损伤 mRNA 代谢的新因子

• 发表时间: 2016
• 作者: 石井健士;早川浩;関口猛;関口睦夫
• 通讯作者: 関口睦夫

Human proteins that recognize oxidative RNA damage

识别RNA氧化损伤的人类蛋白质

• 发表时间: 2017
• 作者: Hayakawa H.;Ishii;T.;Sekiguchi;M.
• 通讯作者: M.

Transcriptional mutagenesis mediated by 8-oxoG induces translational errors in mammalian cells

• DOI: 10.1073/pnas.1718363115
• 发表时间: 2018-04-17
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Dai, Da-Peng;Gan, Wei;Cai, Jian-Ping
• 通讯作者: Cai, Jian-Ping

酸化損傷を受けたRNA鎖に結合する新規因子の同定

鉴定出与氧化损伤的 RNA 链结合的新因子

• 发表时间: 2017
• 作者: 石井健士;井川達弘;関口猛;早川浩;関口睦夫
• 通讯作者: 関口睦夫

毒性物質の排出における出芽酵母Gtr1タンパク質の働き

酿酒酵母Gtr1蛋白在有毒物质排泄中的作用

• 发表时间: 2016
• 作者: 関口猛;石井健士;早川浩;古野伸明;小林英紀;関口睦夫
• 通讯作者: 関口睦夫