アデノシン受容体を介する血管内皮障害の保護機構に関する分子細胞生物学的研究

腺苷受体介导血管内皮损伤保护机制的分子细胞生物学研究

• 批准号: 10177212
• 负责人: 鈴木 宏治
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10177212/
• 关键词: 動脈硬化; アデノシン; アデノシン受容体; 血管内皮細胞; 内皮障害; 内皮障害保護機構; NO; NO産生酵素

正常な血管内皮の抗血栓性機能はトロンビンやTNF-α等の刺激によって低下し、障害内皮上には凝固惹起因子の組織因子(TF)や細胞接着因子VCAM-1等が発現され、内皮細胞上は炎症や血液凝固反応の亢進の場となる。こうした内皮障害は動脈硬化発生の"引き金"になることが示唆されており、動脈硬化発生機構の解明のため内皮障害の発生とその制御機構の解析は重要である。最近、我々は核酸代謝産物のアデノシンが障害内皮細胞上でのTFやVCAM-1の発現を阻害することを見い出し、アデノシン等による内皮保護機構の破綻が動脈硬化の発生に関わる可能性を示唆した。そこで本研究では、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)を用いて、アデノシンによる障害内皮の保護機構に関する分子細胞学的検討を行った。その結果、HUVEC上のTF活性の発現はトロンビンなどの濃度依存性に促進され、このTF活性の発現はアデノシンによって抑制された。アデノシン受容体阻害剤(8-SPT)や受容体特異的アゴニストを用いた解析の結果、アデノシンは主にA3サブタイプアデノシン受容体を介して作用することが示唆された。一方、アデノシンによるHUVEC上のTF活性の産生抑制は、carboxy-PT10、L-NMMA、L-NAMEのいずれでも阻害され、また、培養HUVEC上清中のnitriteおよびcGMP濃度はアデノシンの存在下に有意に増加したが、8-SPT、L-NMMA、L-NAME存在下では低下した。以上の結果から、障害を受けた血管内皮細胞から分泌されたアデノシンは、その受容体を介して障害内皮細胞の保護に働き、血管内皮の抗血栓性機能を保持すること、また、その作用の少なくとも一部はアデノシンが内皮細胞のeNOSを活性化して発現することが示唆された。

The antithrombotic function of normal vascular endothelium is reduced by stimulation of TNF-α, tissue factor (TF) and cell adhesion factor (VCAM-1), inflammation of endothelial cells and hyperactivity of blood coagulation. It is important to analyze the mechanism of atherosclerosis development and its control mechanism. Recently, we have demonstrated the possibility that the breakdown of nucleic acid metabolites may inhibit the development of TF and VCAM-1 in endothelial cells, and that the breakdown of nucleic acid metabolites may contribute to the development of atherosclerosis. In this study, we investigated the molecular cytology of endothelial cells (HUVEC) in vitro and in vivo. As a result, TF activity on HUVEC was promoted in a concentration-dependent manner and inhibited in a concentration-dependent manner. The results of the analysis of the receptor-specific receptor-resistance agent (8-SPT) and the receptor-specific receptor-resistance agent (8-SPT) are as follows: The production of TF activity on HUVEC was inhibited by cyto-PT 10, L-NMMA and L-NAME, and the concentration of nitrite and cGMP in HUVEC supernatant was increased intentionally in the presence of cyto-PT, L-NMMA and L-NAME. The above results show that the inhibition of endothelial cell secretion and receptor mediated the protection of endothelial cells and the maintenance of antithrombotic function of vascular endothelium.

项目成果

Deguchi,H.: "Adenosine regulates tissue factor expression on the endothelial cells." Thromb.Res.91. 57-64 (1998)

Deguchi, H.：“腺苷调节内皮细胞上的组织因子表达。”

Zhou,H.: "Prothrombin and its derivatives stimulate motility of melanoma cells." Thromb.Haemostas.80. 407-412 (1998)

Zhou,H.：“凝血酶原及其衍生物刺激黑色素瘤细胞的运动。”

Hayashi,T.: "Regulation of the human protein C inhibitor gene expression in HepG2 cells: Role of Sp1 and AP2." Biochem.J.332. 573-582 (1998)

Hayashi,T.：“HepG2 细胞中人类 C 蛋白抑制剂基因表达的调节：Sp1 和 AP2 的作用。”

Wakita,T.: "Molecular cloning,tissue distribution and androgen regulation of rat protein C inhibitor." FEBS.Lett.429. 263-268 (1998)

Wakita,T.：“大鼠蛋白 C 抑制剂的分子克隆、组织分布和雄激素调节。”

鈴木 宏治: "血液" 先端医学社, 241 (1999)

铃木浩二：《血》战神医学社，241 (1999)