培養ヒト角膜内皮・実質細胞と再生角膜実質を用いた角膜再生医療実用化技術の確立

角膜内皮および実質の再生医療においては、角膜内皮細胞の培養方法の確立が最も重要な課題の一つである。ヒト角膜内皮細胞の培養方法については、培養液にアスコルビン酸２リン酸を添加することで細胞の増殖を促進し、良好な形態の角膜内皮細胞を得ることができることがわかった。またこのアスコルビン酸２リン酸の角膜内皮細胞への効果は、アスコルビン酸２リン酸による抗酸化作用によるものではなく、アスコルビン酸２リン酸がhepatocyte growth factorの角膜内皮細胞からの分泌をオートクリンに増加させることによるものである事がわかった。臨床において角膜実質の切開に使用されているフェムトセカンドレーザーを用いた角膜実質加工の際の、切開深度の精度や切開面の平滑さ、角膜内皮細胞への傷害について検討した。角膜内皮細胞への傷害に関しては、切開の深さを角膜内皮細胞からの残りの実質が１５０ミクロン、１００ミクロン、７０ミクロンとなるように切開を行った。切開面の平滑さについては切開の深さが１００ミクロン、３００ミクロン、５００ミクロンとなるように切開を行った。その結果としては、切開精度や平滑さは影響を受けないが、角膜内皮から７０ミクロンの深さになると角膜内皮細胞への傷害が大きくなることが分かった。培養内皮細胞とフェムトセカンドレーザーで加工した角膜実質で作成した移植片を移植する際に使用する新しい器具の開発を行った。新しい挿入器具では薄い移植片でも、簡単な押し込み法で移植片を挿入することができ、また角膜内皮へのダメージは、これまでの挿入器具と同等でできることが分かった。

角膜内皮および実質の再生医療においては、角膜内皮細胞の培養方法の確立が最も重要な課題の一つである。ヒト角膜内皮細胞の培養方法については、培養液にアスコルビン酸２リン酸を添加することで細胞の増殖を促進し、良好な形態の角膜内皮細胞を得ることができることがわかった。またこのアスコルビン酸２リン酸の角膜内皮細胞への効果は、アスコルビン酸２リン酸による抗酸化作用によるものではなく、アスコルビン酸２リン酸がhepatocyte growth factorの角膜内皮細胞からの分泌をオートクリンに増加させることによるものである事がわかった。臨床において角膜実質の切開に使用されているフェムトセカンドレーザーを用いた角膜実質加工の際の、切開深度の精度や切開面の平滑さ、角膜内皮細胞への傷害について検討した。角膜内皮細胞への傷害に関しては、切開の深さを角膜内皮細胞からの残りの実質が１５０ミクロン、１００ミクロン、７０ミクロンとなるように切開を行った。切開面の平滑さについては切開の深さが１００ミクロン、３００ミクロン、５００ミクロンとなるように切開を行った。その結果としては、切開精度や平滑さは影響を受けないが、角膜内皮から７０ミクロンの深さになると角膜内皮細胞への傷害が大きくなることが分かった。培養内皮細胞とフェムトセカンドレーザーで加工した角膜実質で作成した移植片を移植する際に使用する新しい器具の開発を行った。新しい挿入器具では薄い移植片でも、簡単な押し込み法で移植片を挿入することができ、また角膜内皮へのダメージは、これまでの挿入器具と同等でできることが分かった。