Bedeutung von Proteinkinase D (PKD)/Proteinkinase Cmy (PKCmy) und Proteinkinase D2 (PKD2) für Proliferation, Differenzierung und Transformation von Colonepithelien GEM mit WO 685/9-1, -/9-2

蛋白激酶 D (PKD)/蛋白激酶 Cmy (PKCmy) 和蛋白激酶 D2 (PKD2) 对结肠上皮细胞增殖、分化和转化的重要性 GEM 与 WO 685/9-1, -/9-2

• 批准号: 5377926
• 负责人: Professor Dr. Thomas Seufferlein
• 金额: --
• 依托单位: Klinik für Innere Medizin I
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2005-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5377926?language=en
• 关键词: Bedeutung; von; Proteinkinase; PKD; Cmy

Die Serin-Threoninkinasen PKD/PKCµ und die von uns klonierte PKD2 sind im Colonepithel hoch exprimiert und können durch neuropeptide wie Gastrin, durch Kinasen der PKC-Familie, aber auch direkt durch Diacylglycerol und Gallensäure aktiviert werden. Gastrin ist ein Schlüsselhormon in der Colonkarzinogenese, PKCµ/PKD wirkt antiapoptotisch und proliferationsfördernd. Daher könnten PKD/PKCµ und PKD2 an der Transformation von Colonepithelien beteiligt sein. Im vorliegenden Antrag soll deshalb die mögliche Bedeutung dieser Proteinkinasen für Wachstum, Transformation und Differenzierungsgrad humaner Colonkarzinomzellen in vitro und in transgenen Mausmodellen in vivo untersucht werden. Für die geplanten Untersuchungen werden ein Colonkarzinom-Zellmodelle erstellt, in denen eine durch Tetracyclin induzierbare Expression von Kinase-inaktiver PKD/PKCµ bzw. PKD2 möglich ist und es werden Wachstumsverhalten, Apoptosesuszeptibilität und Differenzierungsgrad dieser Zellen uner basalen und induzierten Bedingungen untersucht. Wir werden ferner ein transgenes Tiermodell mit Expression von PKD/PKCµ bzw. PKD1 unter Kontrolle des durch Zink induzierbaren Metallothioninpromoters generieren. Um einen möglichen Einfluß der Expression einer der Kinasen auf die Adenom-Karzinom-Sequenz zu beurteilen, werden wir die transgenen Tiere mit heterozygoten APC(Min) Mäusen oder p53-/-Mäusen einkreuzen. als weiteren, neuen Ansatz möchten wir ein transgenes Konstrukt erstellen, in dem PKD/PKCµ bzw. PKD2 und zugleich EGFP (für enhanced grünfluoreszierendes Protein) in Mäusen transgen exprimiert werden. Dies würde zum einen die Identifikation der Expression des Transgens erleichtern, zum anderen können so Veränderungen in PKD/PKCµ- bzw. PKD2-exprimierenden Geweben sowie möglicherweise Metastasierung z.B. unter Einwirkung von Karzinogenen wie Azoxymethan, sehr viel leichter detektiert werden.

丝氨酸-苏氨酸激酶PKD/PKC和PKD 2在结肠上皮细胞中的表达与胃泌素等神经肽有关，PKC家族的激酶也可直接通过甘油二酯和甘油韦尔登激活。胃泌素是结肠癌发生、PKCμ/PKD抑制肿瘤和增殖的一种激素。研究PKD/PKCμ和PKD 2在结肠上皮细胞转化中的作用。Im vorliegenden Antrag soll deshalb die mögliche Bedeutung dieser Proteinkinasen für Wachstum，Transformation und Differenzierungsgrad humanColonkarzinomzellen in vitro and in transgenen Mausmodellen in vivo untersucht韦尔登.为了研究PKD/PKC激酶抑制剂的表达，我们建立了一个韦尔登-Zell模型。PKD 2是一个非常复杂的韦尔登，在基础和基础上分化的细胞凋亡和差异。我们将韦尔登发现一种表达PKD/PKC的转基因Tiermodell。PKD 1通过锌诱导金属硫蛋白启动子产生。韦尔登通过APC（Min）Mäusen或p53-/-Mäusen的杂合型转基因小鼠，可以更好地影响Kinasen在Adenom-Karzinom-Sequenz中的表达。此外，我们还将在PKD/PKC基因组中引入新的转基因结构。PKD 2和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）在Mäusen transgen explanert韦尔登。Dies würde zum einen die Identifikation der Expression des Transgens erleichtern，zum anderen können so Veränderungen in PKD/PKCµ- bzw. PKD 2-外显细胞转移在与氧化偶氮甲烷一样的致癌物质中，韦尔登的检出率非常高。