In-cell NMRによる真核細胞内蛋白質の立体構造解析法の開発
开发使用细胞内 NMR 进行真核蛋白质 3D 结构分析的方法
基本信息
- 批准号:21200044
- 负责人:
- 金额:$ 19.39万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research a proposed research project)
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 2011
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
最近,細胞内のMolecular Crowdingが蛋白質動態に及ぼす影響が議論され始めており,蛋白質の機能を理解するためには,生細胞中での詳細な「その場観察」が必須であると考えられるようになって来た.その手段としてin-cell NMRが注目されている.本研究では,進化しつつあるin-cell NMR測定技術の次の大きな目標として,「真核細胞」における蛋白質の立体構造解析を可能にする方法論的研究・開発を行う.蛋白質が実際に機能している場である生きた真核細胞における世界初の蛋白質分子の立体構造決定を目指し,in-cell NMRを用いた新しい解析手法の開発研究を行うことを目的とする.H22年度の研究実績は以下の通りである.分裂酵母のin-cell NMRについては,分裂酵母内在の蛋白質Hsp9について,予備的なin-cell NMR測定とin vivoでのNMR解析を行った.培養昆虫細胞Sf9のin-cell NMRについては,連鎖球菌protein G B1ドメイン(GB1)と高度好熱菌TTHA1718の発現系を作成し,Sf9における良好な蛋白質発現を達成した.このうちGB1については,in-cell NMRを用いて良好な^1H-^<15>N HSQCスペクトルを得ることに成功した.真核細胞内で発現させた蛋白質のin-cell NMR測定例としては世界初となる.HeLa細胞の系では,TTHA1718を用いて,細胞内蛋白質の詳細な解析のために必要な3D triple- resonance NMR測定のための予備的なin-cell NMR測定を行い,良好な結果を得た.
Recently, Molecular Crowding protein kinesiology and immunoassay have begun to occur. The protein enzyme machine can understand the enzyme activity in the cell, so it is necessary to monitor the activity of the protein in the cell. He used in-cell NMR to keep an eye on him. The purpose of this study is to improve the technology of in-cell NMR measurement, and the research on the theory of three-dimensional analysis of protein in eukaryotic cells. The world's primary protein molecules have been stereoscopically engineered to determine the target, and in-cell NMR has used a new analytical method to carry out the study. The purpose of the study is to determine the target of the molecular biology of the world's primary protein. H22. Split the yeast "in-cell NMR", split the yeast internal protein "Hsp9", prepare "in-cell NMR" in vivo "NMR analysis". Sf9, in-cell NMR, GB1, TTHA1718, Sf9, protein, protein. The GB1 is good, and the in-cell NMR uses good ^ 1H-^ & lt;15>N HSQC good to win success. Eukaryotic intracellular protein (in-cell NMR) assay was used to determine the level of in-cell NMR in the whole world. HeLa cell line was purified by TTHA1718, and intracellular protein was analyzed by 3D triple- resonance NMR assay.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
In-cell NMR studies of protein structure and dynamics inside living cells
活细胞内蛋白质结构和动力学的细胞内核磁共振研究
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:中井陽一;日高宏;渡部直樹;小島隆夫;水野真木子;伊藤隆
- 通讯作者:伊藤隆
NMR protein structure determination in living E. coli cells using nonlinear sampling
- DOI:10.1038/nprot.2010.69
- 发表时间:2010-01-01
- 期刊:
- 影响因子:14.8
- 作者:Ikeya, Teppei;Sasaki, Atsuko;Ito, Yutaka
- 通讯作者:Ito, Yutaka
Structure and dynamics of proteins at work inside cells
细胞内工作蛋白质的结构和动力学
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:伊藤隆
- 通讯作者:伊藤隆
Solution structure of a zinc-finger domain that binds to poly-ADP-ribose
- DOI:10.1111/j.1365-2443.2009.01369.x
- 发表时间:2010-02-01
- 期刊:
- 影响因子:2.1
- 作者:Isogai, Shin;Kanno, Shin-Ichiro;Shirakawa, Masahiro
- 通讯作者:Shirakawa, Masahiro
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
伊藤 隆其他文献
Hot-mesh CVD 法を用いた原料ガスパルス供給によるGaN成長
利用热网CVD法脉冲供给原料气体进行GaN生长
- DOI:
- 发表时间:
2008 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
小前泰彰;深田祐介;黒木雄一郎;末光眞希;伊藤 隆;成田克;遠藤哲郎;中澤日出樹;高田雅介;安井寛治;赤羽正志 - 通讯作者:
赤羽正志
電気化学エネルギー変換デバイス材料のその場ラマン分光
电化学能量转换器件材料的原位拉曼光谱
- DOI:
- 发表时间:
2008 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
H. Miyasaka;T. Izawa;N. Takahashi;M. Yamashita;and K. R. Dunbar;伊藤 隆 - 通讯作者:
伊藤 隆
Application of nonlinear sampling and maximum entropy reconstruction to"difficult"protein samples
非线性采样和最大熵重构在“困难”蛋白质样品中的应用
- DOI:
- 发表时间:
2008 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
小田浩之;佐藤哲也;太田元規;藤 博幸;斉藤肇;藤 博幸;伊藤 隆 - 通讯作者:
伊藤 隆
X-ray crystallographic study and NMR analyses of protonation state of chromophore of cyanobacterial photoreceptor protein
蓝藻感光蛋白发色团质子化状态的X射线晶体学研究和核磁共振分析
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
飯塚 佑介;永江 峰幸;青山 洋史;伊集院 良祐;伊藤 隆;広瀬 侑;三島 正規 - 通讯作者:
三島 正規
エーテル溶媒を用いたアモルファスGe酸化物におけるナトリウムイオン二次電池特性の向上
使用醚溶剂改善非晶氧化锗钠离子二次电池特性
- DOI:
- 发表时间:
2017 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
梶田 徹也;伊藤 隆 - 通讯作者:
伊藤 隆
伊藤 隆的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('伊藤 隆', 18)}}的其他基金
金属の溶解析出反応を制御する有機物添加剤の超高感度ラマン分光学解析
控制金属溶解沉淀反应的有机添加剂的超灵敏拉曼光谱分析
- 批准号:
23K23441 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
In situ SERS spectroscopy for organic additives with controlling metal deposition
用于控制金属沉积的有机添加剂的原位 SERS 光谱
- 批准号:
22H02173 - 财政年份:2022
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
In-situ structural biology by NMR spectroscopy
通过核磁共振波谱进行原位结构生物学
- 批准号:
21H02419 - 财政年份:2021
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
解析困難な蛋白質の高精度立体構造決定法の開発
开发难以分析的蛋白质的高精度三维结构测定方法
- 批准号:
22510237 - 财政年份:2010
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
In-Cell NMRを用いた生細胞内蛋白質の物性・動態解析法の開発
开发一种使用细胞内核磁共振分析活细胞中蛋白质的物理性质和动力学的方法
- 批准号:
20050024 - 财政年份:2008
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
細胞膜を介した金属の恒常性維持に関与する蛋白質の構造生物学
参与维持跨细胞膜金属稳态的蛋白质的结构生物学
- 批准号:
19036024 - 财政年份:2007
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
ミトコンドリア膜を介した鉄の恒常性維特に関与するABC輸送体の構造・機能解析
ABC 转运蛋白的结构和功能分析,特别是通过线粒体膜参与铁稳态
- 批准号:
17048033 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
好アルカリ性好塩性古細菌の系統分類学的研究
嗜碱嗜盐古菌的系统发育研究
- 批准号:
04F04852 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
ミトコンドリア膜を介した鉄の恒常性維持に関与するABC輸送体の構造生物学
ABC转运蛋白通过线粒体膜维持铁稳态的结构生物学
- 批准号:
16048230 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
ln-Cell NMR:細胞内蛋白質間相互作用の直接解析法の開発
细胞内核磁共振:开发直接分析细胞内蛋白质-蛋白质相互作用的方法
- 批准号:
15657031 - 财政年份:2003
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
相似海外基金
蛋白質結晶エッチング法による生体高次構造体の創成
使用蛋白质晶体蚀刻方法创建生物高阶结构
- 批准号:
15J11955 - 财政年份:2015
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
Development of analysis method for dynamic state in high order structure of protein utilizing neutron scattering
中子散射蛋白质高阶结构动态分析方法的发展
- 批准号:
24310068 - 财政年份:2012
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Analysis for Dynamics on High Order Structure of Protein
蛋白质高阶结构动力学分析
- 批准号:
21540417 - 财政年份:2009
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
低分子量G蛋白質の高次構造多型性のシグナル伝達における意義
低分子量G蛋白构象多态性在信号转导中的意义
- 批准号:
20054011 - 财政年份:2008
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Study on Mechanism of Formation of High-Order Structure of Protein
蛋白质高级结构形成机制的研究
- 批准号:
19540427 - 财政年份:2007
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
低分子量G蛋白質の高次構造多型性のシグナル伝達における意義
低分子量G蛋白构象多态性在信号转导中的意义
- 批准号:
18057014 - 财政年份:2006
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
テロメアの1本鎖DNA領域に結合する蛋白質の高次構造とテロメア調節機構
端粒单链DNA区域结合蛋白的高阶结构及端粒调控机制
- 批准号:
04J02801 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
テロメアの1本鎖DNA領域に結合する蛋白質Pot1の高次構造とテロメア調節機構
端粒单链DNA区域结合蛋白Pot1的高阶结构及端粒调控机制
- 批准号:
15023253 - 财政年份:2003
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
ダニアレルゲン蛋白質の高次構造に焦点をあてたIgEエピトープ解析及びワクチン設計
关注螨过敏原蛋白高阶结构的 IgE 表位分析和疫苗设计
- 批准号:
14760059 - 财政年份:2002
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
時間分解振動分光法による蛋白質高次構造変化の機能に果す役割の解明
使用时间分辨振动光谱阐明蛋白质构象变化在功能中的作用
- 批准号:
13308039 - 财政年份:2001
- 资助金额:
$ 19.39万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)