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Topologie und Funktion von Rad51-Proteinkomplexen im Säugerzellkern: eine neue Domäne ("Repairosom") für DNA-Reparatur und Rekombination

哺乳动物细胞核中Rad51蛋白复合物的拓扑结构和功能：用于DNA修复和重组的新结构域（“修复体”）

基本信息

批准号：
5389575
负责人：
Professor Dr. Thomas Haaf
金额：
--
依托单位：
Institut für Humangenetik
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
1997
资助国家：
德国
起止时间：
1996-12-31 至 2004-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5389575?language=en
关键词：
Topologie und Funktion von Rad51

项目摘要

(Wortlaut des Antrags)Rekombination zwischen homologen DNA-Sequenzen ist ein von den Bakterien bis zum Menschen konservierter Mechanismus für die Reparatur geschädigter DNA-Moleküle und den Austausch von Erbinformation. Unsere bisherigen Untersuchungen lassen vermuten, daß die Rad51-Rekombinase bei Säugern neben der klassischen Reparaturfunktion auch eine anti-apoptotische Wirkung hat und eine wichtige Rolle bei der malignen Entartung von Zellen spielt. Zur Analyse der Rekombinationsfunktion werden DNA-RecANukleoproteinfilamente in Säugerzellen transfiziert und homologe Rekombinationsereignisse in situ analysiert. Die säugerspezifischen Funktionen werden in Rad51-überexprimierenden Zellen und durch die Inaktivierung von Rad51 mit antisenseOligonukleotiden studiert. Um die gemeinsame Regulation von Rad51 und einer großen Zahl anderer Proteine zu charakterisieren, wird die Expression von bekannten Reparatur-, Zellzyklus- und Apoptosegenen durch die Hybridisierung von cDNA-Populationen aus Rad51-überexprimierenden bzw. behandelten Zellkulturen auf speziell hergestellte cDNA-Mikroarray-Chips quantifiziert. Die Interaktion von Rad51 mit dem Mitoseinhibitor p21 und dem Tumorsuppressor p53 wird durch biochemische (FPLC, Immunpräzipitation) und in vitro-Assays untersucht.

同源DNA测序的重组是一种由Bakterien bis zum Menschen konservierter Mechanismus für die Reparatur geschädigter DNA-Moleküle und den Austausch von Erbinformation.我们的研究结果显示，Rad 51-Rekombinase在Säugern的经典修复功能中也有一个抗过敏的Wirkung帽子和一个在Zellen spielt的抗过敏的Entartung中的重要角色。Zur Analyse der Rekombinationsfunktion韦尔登DNA-RecANukleoproteinfilamente in Säugerzellen transfiziert und homolog Rekombinationsereignisse in situ analysiert.在Rad 51中的säugerspezifischen函数韦尔登是通过对Rad 51的反义寡核苷酸的研究而产生的。通过对Rad 51和一个大的Zahl和derer蛋白质的共同调控，可以通过与Rad 51的cDNA-群体杂交来表达修复、Zellzyklus和凋亡。将Zellkulturen应用于特定的cDNA-Mikroarray-Chips定量。Rad 51与Mitoseinhibitor p21和Tumorsuppressor p53的相互作用通过生物化学（FPLC，免疫沉淀）和体外试验来检测。