肝特異的トランスポーターの発現変動におけるエピジェネティック制御機構の解析

肝脏特异性转运蛋白表达变化的表观遗传调控机制分析

• 批准号: 21659037
• 负责人: 楠原 洋之
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659037/
• 关键词: トランスポーター; 異物解毒; 肝細胞; エピジェネティクス; DNAメチル化

OATPmRNAが発現していないHepG2細胞において, MBD2のノックダウンにより肝特異的トランスポーターOATP1B3が誘導されることを昨年度明らかにした。DNAメチル化阻害剤5azadCによる処理でも、OATP1B3の発現誘導が観察されるが、この誘導されるOATP1B3遺伝子の塩基配列を確認したところ、正常肝とは異なる転写開始点から転写が行われており、N末領域が異なる変異型のOATP1B3であることを明らかにした。OATP1B3を内因性に発現するPK-8細胞においても、この変異型のOATP1B3であることを確認した。OATP1B3の新規バリアントの転写開始点近傍のCpG sites (TSS-300～+100の範囲、10箇所)について、DNAメチル化状態をbisulfite sequencing法で解析した。HepG2ならびにPK-8では正常肝で見られる転写開始点付近はメチル化されており、特にPK-8ではメチル化パターンと発現との間に乖離が見られた。しかし、改めてバリアントの転写開始点付近のDNAメチル化状態を確認したところ、正常肝では5'領域ならびに転写開始点下流も高度にメチル化されており、HepG2細胞では(-279、-264、+21)の3箇所において、PK-8細胞で観察されるよりもメチル化が有意であり、これらのサイトが発現抑制に関わっていることが示唆された。この変異型OATP1B3の機能については、さらに検討する必要がある。肝臓特異的に発現するOATPに関しては、DNAメチル化によりその発現が制御されていることを明らかにした。

OATPmRNA が 発 now し て い な い HepG2 cells に お い て, MBD2 の ノ ッ ク ダ ウ ン に よ り liver specific ト ラ ン ス ポ ー タ ー OATP1B3 が induced さ れ る こ と を yesterday annual Ming ら か に し た. DNA メ チ ル chemical resistance against one of five azadc に よ る 処 Richard で も, OATP1B3 の 発 now induced が 観 examine さ れ る が, こ の induced さ れ る OATP1B3 posthumous son 伝 の salt base with column を confirm し た と こ ろ, normal liver と は different な る planning write start か ら line planning write が わ れ て お り, N at the end of the field が different な る - alien の OATP1B3 で Youdaoplaceholder0 に とを Ming ら に に た. OATP1B3 を endogenous に 発 now す る PK - 8 cells に お い て も, こ の - alien の OATP1B3 で あ る こ と を confirm し た. OATP1B3 の new rules バ リ ア ン ト の planning write close to the starting point alongside の CpG sites (TSS - 300 ~ + 100 の van 囲, 10) に つ い て, DNA メ チ ル change state を bisulfite sequencing method で し た. HepG2 な ら び に PK - 8 で は normal liver で see ら れ る planning to write the starting point to pay nearly は メ チ ル change さ れ て お り, に PK - 8 で は メ チ ル change パ タ ー ン と 発 now と の に between good see ら が れ た. し か し, change め て バ リ ア ン ト の planning to write the starting point to pay nearly の DNA メ チ ル change state を confirm し た と こ ろ, normal liver で は 5 'field な ら び に planning to write the starting point of dirty も highly に メ チ ル change さ れ て お り, HepG2 cells で は (279-264, 21) + の に by three お い て, PK - 8 cells で 観 examine さ れ る よ り も メ チ ル change が intentionally で あ り, こ れ ら の サ イ ト が 発 now inhibit に masato わ っ て い る こ と が in stopping さ れ た. The functions of the <s:1> variant OATP1B3 are に に に て て, さらに検 for する and necessary がある. A routine liver specific に 発 now す る OATP に masato し て は, DNA メ チ ル change に よ り そ の 発 now が suppression さ れ て い る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

Roles of DNA Methylation and Methyl-DNA Binding Proteins in the Expression of Organic Anion Transporting Polypeptide 1B3 in HepG2 Cells

DNA甲基化和甲基-DNA结合蛋白在HepG2细胞中有机阴离子转运多肽1B3表达中的作用

• 发表时间: 2010
• 作者: Imai S;et al
• 通讯作者: et al

DNA methylation and histone modification profiles of mouse organic anion transporting polypeptides.

小鼠有机阴离子转运多肽的 DNA 甲基化和组蛋白修饰谱。

• DOI: 10.1124/dmd.112.047969
• 发表时间: 2013
• 期刊: Drug Metab Dispos
• 影响因子: 3.9
• 作者: 石濱 伸明;能年 義輝;崔 勝媛;Saska Ivana;野村 有子;中神 弘史;村山 和隆;白水 美香子;斎藤 臣雄;長田 裕之;白須 賢;Imai S.
• 通讯作者: Imai S.

Genome-wide analysis of epigenetic signatures for kidney-specific transporters

• DOI: 10.1038/ki.2010.176
• 发表时间: 2010-09-01
• 期刊: KIDNEY INTERNATIONAL
• 影响因子: 19.6
• 作者: Kikuchi, Ryota;Yagi, Shintaro;Shiota, Kunio
• 通讯作者: Shiota, Kunio

肝・腎特異的な有機アニオントランスポーターの発現制御機構の解析

肝肾特异性有机阴离子转运蛋白表达调控机制分析

• 发表时间: 2009
• 作者: Imai S;et al;楠原洋之
• 通讯作者: 楠原洋之

DNA Methylation Profiles of Organic Anion Transporting Polypeptide 1B3 in Cancer Cell Lines

• DOI: 10.1007/s11095-010-0064-3
• 发表时间: 2010-03-01
• 期刊: PHARMACEUTICAL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Ichihara, Sayaka;Kikuchi, Ryota;Sugiyama, Yuichi
• 通讯作者: Sugiyama, Yuichi