細菌型mitoNEET新規構造に立脚したレドックスシステム生理学的解析

基于细菌mitoNEET新结构的氧化还原系统生理分析

• 批准号: 21659111
• 负责人: 岩崎 俊雄
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659111/
• 关键词: mitoNEET; 鉄硫黄クラスター; 金属蛋白質; 好熱菌; レドックス; 構造機能生理; 国際情報交流; アメリカ; アメリカ:ドイツ

細菌型mitoNEETは[2Fe-2S]クラスターをもつ可溶性蛋白質であり、電子伝達、あるいは生体内レドックス・バランスと対応した新しい生体内システムと推察される。高度好熱菌Thermus thermophilusゲノム解析で見出した細菌型mitoNEETホモログ(TthNEET0026)につき、構造機能生理解析を連携して行い、平成22年度には以下の主要成果を得た。1.T.thermophilus HB8のTthNEET0026欠損株を作成し、生育阻害が認められたため、好熱菌主要代謝系につき網羅的メタボローム解析を行い、野生株と比較機能解析した。本研究成果は、昨年度の構造解析結果と合わせ、今後論文として発表する。2.Hisタグ付加したTthNEET0026の相同組換株を作成したが、欠損株と同様に生育阻害された。このため、酵素の両末端ではなく、内部配列にタグを組み込んだ変異株作成と表現型解析をすすめる予定である。3.TthNEET0026の[2Fe-2S]クラスターの配位残基His52→Cys変異を導入することで、鉄硫黄クラスターの性質を変化させた変異酵素を作成、昨年度に続き詳細な分光解析を行った。今後、論文として発表する。3.好熱菌よりも遺伝子操作しやすいシアノバクテリアのゲノム情報ベースに基づき、細菌型mitoNEETホモログを検討し、リコンビナント蛋白質を作成、新規mitoNEETホモログであることを世界ではじめて同定した。シアノバクテリアホモログは凝集しやすく、好熱菌ホモログよりも扱いにくいが、その相手蛋白質候補を見出したため、共発現・欠損株作成等を今後行い、新たな展開をはかる筋道をつけることができた。

Bacterial type mitoNEETは[2Fe-2S]クラスターをもつSoluble proteinであり, electron den Tatsu, あるいは生内レドックス・バランスと対応した新しい生内システムと看看される. Highly thermophilic bacteria Thermus thermophilus ゲノムAnalysis and identification of bacterial type mitoNEETホモログ (TthNEET0026), structure, function and physiological analysis of continuation and operation, and the following major results in 2009 were obtained. 1.T.thermophilus HB8's TthNEET0026 defective strain has been produced, the growth inhibitor has been identified, the main metabolic system of thermophilic bacteria has been analyzed and analyzed, and the wild strain has been compared and analyzed. The results of this research are combined with the results of last year's structural analysis, and the results of future papers are summarized. 2.Historage plus TthNEET0026 is the same as the replacement strain of the same group, and the loss of the strain is the same as the growth inhibition.このため, enzyme の両 terminal ではなく, internal arrangement にタグを group み込んだ変different strain creation and phenotypic analysis をすすめる predetermined である. 3.TthNEET0026の[2Fe-2S]クラスターの coordination residue His52→Cys is different and is introduced.ることで, 鄄sulfur クラスターの性を変化させた変isozymeを was made, and the detailed spectroscopic analysis of last year's に続きを行った. From now on, the paper will be published. 3. Thermophilic bacterium よりも缝子operator, bacteria-type mitoNEETログを検し, リコンビナントprotein を成,新动NEETホモログであることを世界ではじめて同定した.シアノバクテリアホモログは agglutination しやすく, Thermophilic bacteria ホモログよりも扱いにくいが, その心手protein candidateを见出したため, 同発 appear・ defective strains are made, etc. を下行い, 新たな开户をはかる道をつけることができた.

项目成果

補欠分子族と生命初期進化:有機物と無機物のインターフェース(ワークショップ・セッション2W21-8)

假体基团和生命的早期进化：有机物和无机物的界面（研讨会会议 2W21-8）

• 发表时间: 2010
• 作者: 鴻巣麻子;他;岩崎俊雄
• 通讯作者: 岩崎俊雄

Continuous-Wave and Pulsed EPR Characterization of the [2Fe-2S](Cys)3(His)1 Cluster in Rat MitoNEET

• DOI: 10.1021/ja903228w
• 发表时间: 2009-09-30
• 期刊: JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
• 影响因子: 15
• 作者: Iwasaki, Toshio;Samoilova, Rimma I.;Dikanov, Sergei A.
• 通讯作者: Dikanov, Sergei A.

Iron-sulfur world in aerobic and hyperthermoacidophilic archaea Sulfolobus (Review)

需氧和超嗜酸古菌硫化叶菌中的铁硫世界（综述）

• 发表时间: 2010
• 期刊: Archaea
• 影响因子: 2.4
• 作者: Okamoto T.;et al;Toshio Iwasaki
• 通讯作者: Toshio Iwasaki

Toward heterologous overexpression of hyperthermophilic archaeal iron-sulfur metalloenzyme complexes in Escherichia coli : a case study with the archaeal recombinant SdhC subunit.

大肠杆菌中超嗜热古菌铁硫金属酶复合物的异源过度表达：古菌重组 SdhC 亚基的案例研究。

• 发表时间: 2009
• 作者: 鴻巣麻子;他
• 通讯作者: 他

長いHisタグ伸長鎖をつけて結晶化した超好熱菌古細菌Rieskeフェレドキシンの構造・変異酵素解析(4P-0323)

带有长组氨酸标签的延伸链结晶的超嗜热古菌 Rieske 铁氧还蛋白 (4P-0323) 的结构和突变酶分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 鴻巣麻子;他
• 通讯作者: 他