歯周組織幹細胞のエピジェネティクスとその制御の分子基盤

牙周组织干细胞表观遗传学及其调控的分子基础

• 批准号: 21659482
• 负责人: 村上 伸也
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659482/
• 关键词: 歯周組織幹細胞; エピジェネティクス; DNAメチル化; 歯根膜組織

本研究課題では、歯根膜細胞のエピジェネティクス情報とその生物学的意義について、DNAメチルに焦点を絞り解析を行なった。平成21年度の研究結果から、マウス歯根膜組織由来MPDL22細胞の増殖や分化におけるDNAメチル化の関与は明らかとならなかった。そこで本年度は、引き続きMPDL22細胞を用いて、炎症反応制御や創傷治癒過程に重要な役割を担うアデノシンの産生酵素であるCD73分子に着目し、同分子の発現がDNAメチル化によって制御されているのか否かについて解析した。CD73は、転写開始点の上流にCpGアイランドが存在し、また加齢に伴い減少するという報告がある。そこで、MPDL22にDNAメチル化阻害剤である5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-dC)を作用させ、CD73分子の発現をFACSにて解析した。その結果、同試薬による処理、非処理でCD73分子の発現に著名な差は認めなかった。次に、ヒト歯根膜細胞(HPDL)の細胞機能におけるDNAメチル化の役割を明らかにするために、HPDLに発現する全遺伝子を対象とし、DNAメチル化によりサイレンシングされている遺伝子を網羅的にスクリーニングした。すなわち5-aza-dCをヒト歯根膜細胞に、50%細胞増殖抑制を示す1μMの濃度で4日間作用させ、遺伝子発現をマイクロアレイにて解析した。その結果、同試薬の処理により発現が10倍以上上昇した遺伝子を56個同定した。そのうち転写開始点の上流10kb以内にCpGアイランドが存在する遺伝子は、NCBI Map Viewerを用いた解析によって、44個同定された。これら遺伝子の発現は、5-aza-dC非処理では非常に低く抑えられており、同試薬処理により発現が誘導されるスイッチオン型の発現パターンを示したことから、DNAメチル化によってサイレンシングされている可能性が示唆された。このような歯根膜細胞のエピジェネティクス情報の集積は、歯根膜組織の特異性を見出す一助になると考えられる。

This research topic で は, 歯 root membrane cells の エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク ス intelligence と そ の biological significance に つ い て, DNA メ チ ル に focus を wring line analytical を り な っ た. Pp.47-53 21st annual の results か ら, マ ウ ス 歯 root membrane tissue origin MPDL22 cells や の raised colonization に お け る DNA メ チ ル change の masato Ming ら は か と な ら な か っ た. そ こ で は this year, led き 続 き MPDL22 cells を using い て royal や wound healing, inflammation, anti 応 system に cut を bear important な service う ア デ ノ シ ン の produce enzymes で あ る CD73 に mesh し, with molecules の 発 now が DNA メ チ ル change に よ っ て suppression さ れ て い る の か no か に つ い て parsing し た. CD73 は, planning to write the starting point の high-class に CpG ア イ ラ ン ド が し, ま た plus 齢 に with い reduce す る と い う report が あ る. そ こ で, MPDL22 に DNA メ チ ル chemical resistance against tonic で あ る 5 - aza - 2 '- deoxycytidine (5 - aza - dC) を role さ せ, CD73 molecular の 発 を now both FACS に て parsing し た. The そ <s:1> results showed that there were に significant な differences in による of the でCD73 molecule <e:1> between the same drug による treatment and the non-treatment, and めな った った. に, ヒ ト 歯 (HPDL) の root membrane cells function に お け る DNA メ チ ル change cut を の service Ming ら か に す る た め に, HPDL に 発 now す る totally survived 伝 を like と seaborne し, DNA メ チ ル change に よ り サ イ レ ン シ ン グ さ れ て い る heritage 伝 son を snare に ス ク リ ー ニ ン グ し た. す な わ ち 5 - aza - dC を ヒ ト 歯 root membrane cells に, 50% raised colonization inhibit を で す 1 mu M の concentration in 4 day role さ せ, but 伝 発 now を マ イ ク ロ ア レ イ に て parsing し た. The results of そ そ showed that the treatment with the same drug showed a が tenfold increase in <s:1> た residue 伝 を of 56 identical た. そ の う ち planning write start の upper within 10 KB に CpG ア イ ラ ン ド が exist す る heritage 伝 は, NCBI Map Viewer を with い た parsing に よ っ て, 44 with さ れ た. こ れ ら posthumous son 伝 の 発 は now, 5 - aza - dC not 処 で は very low に く え suppression ら れ て お り, try with 薬 処 Richard に よ り 発 now が induced さ れ る ス イ ッ チ オ ン type の 発 now パ タ ー ン を shown し た こ と か ら, DNA メ チ ル change に よ っ て サ イ レ ン シ ン グ さ れ て い が る possibility in stopping さ れ た. こ の よ う な 歯 root membrane cells の エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク ス intelligence の set product は, の 歯 root membrane organization specificity を shows す on help に な る と exam え ら れ る.

项目成果

歯周組織恒常性維持の分子基盤研究 -歯根膜特異的分子PLAP-1の解析-

维持牙周组织稳态的分子基础研究-牙周膜特异性分子PLAP-1分析-

• 发表时间: 2009
• 作者: G.Ganburged;et al;山田聡
• 通讯作者: 山田聡

CD73分子による骨芽細胞分化制御とDNAメチル化の関与

CD73分子对成骨细胞分化的调节及DNA甲基化的参与

• 发表时间: 2010
• 作者: 伊山舜吉;村上伸也
• 通讯作者: 村上伸也