Application of a cell-free protein display technology to the high-throughput functional proteomic screen for regulators of neuron-glia interaction

无细胞蛋白质展示技术在神经元-胶质细胞相互作用调节因子高通量功能蛋白质组筛选中的应用

• 批准号: 23659141
• 负责人: SAKURAI Takashi
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23659141/
• 关键词: 神経科学; プロテオーム; 組換え抗体; 薬理学

Fluorophore-assisted light inactivation (FALI) in combination with a cell-based assay is a uniquemethod for functional proteomic screen to search for regulators of a specific cellular function. One of the major problems with the method is the construction of antibody libraries that contain high-affinity binders to cell surface membrane proteins as potential targets. To overcome barriers to efficiency, we used a cell-free antibody display method. We tried to optimize the in vitro expression of the recombinant antibody that is linked to its genotype and the neuregulin-erbB model system for pilot-scale screening ofpotential regulators for neuron-glia interaction

荧光团辅助光失活（Fluorophore-assisted light inactivation，FLI）结合细胞分析是一种功能蛋白质组学筛选的有效方法，可用于寻找特定细胞功能的调节因子。该方法的主要问题之一是构建抗体文库，所述抗体文库含有对作为潜在靶点的细胞表面膜蛋白的高亲和力结合剂。为了克服效率障碍，我们使用了无细胞抗体展示方法。我们试图优化与基因型相关的重组抗体的体外表达，以及神经调节蛋白-erbB模型系统，用于中试筛选神经元-胶质细胞相互作用的潜在调节因子

项目成果

In vitro evolution of peptide aptamers against survivin from a novel three-finger scaffold library by cDNA display

通过 cDNA 展示从新型三指支架文库中体外进化抗存活蛋白肽适体

• 发表时间: 2011
• 作者: 日下部 力;菊川 峰志;神谷 昌克; 相沢 智康;河野 敬一;井原 邦夫; 加茂 直樹;出村 誠;Y. Yotsumoto,Y. Mochizuki,M. Suzuki,K. Nishigaki,N. Nemoto
• 通讯作者: Y. Yotsumoto,Y. Mochizuki,M. Suzuki,K. Nishigaki,N. Nemoto

組換え抗体ライブラリーと光による蛋白質機能不活性化法（FALI）を用いた創薬標的探索

使用重组抗体库和光诱导蛋白功能失活 (FALI) 进行药物发现靶标搜索