Effects of DNA-protein cross-link lesions on eukaryotic transcription and replication

DNA-蛋白质交联损伤对真核转录和复制的影响

• 批准号: 23710070
• 负责人: NAKANO Toshiaki
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23710070/
• 关键词: DNA損傷; 転写; 複製

DNA-protein cross-links (DPCs) are superbulky and ubiquitous DNA lesions induced by various agents. It is likely that DPCs interfere with many aspects of DNA transactions. In the present study, we established in vitroassays to investigate the effect ofDPCs on eukaryotic transcription catalyzed by RNA polymerase II, showing that the formation of runoff products are dependent on the amount of nuclear cell extracts and reaction time. We then analyzed the effect of a model bulky lesion (fluorescein) on transcription. Fluorescein on the transcribed strand but not on the nontrascribed strand inhibited the transcription. We also established a novel method to introduce DPCs by employing Click reactions between protein azides and C5 alkyne-dT. We are currently studying the effect of DPCs on transcription by RNA polymerase II.

DNA-蛋白质交联（DPC）是由各种试剂诱导的超大体积和普遍存在的DNA损伤。DPC可能会干扰DNA事务的许多方面。在本研究中，我们建立了在体外实验，以调查的影响DPC的真核转录的RNA聚合酶II催化，表明径流产品的形成是依赖于核细胞提取物的量和反应时间。然后，我们分析了模型大块病变（荧光素）对转录的影响。转录链上的黄绿素抑制转录，而非转录链上的黄绿素不抑制转录。我们还建立了一种新的方法，引入DPC之间的点击反应蛋白质叠氮化物和C5炔-dT。我们目前正在研究DPC对RNA聚合酶II转录的影响。

项目成果

DNA-protein crosslinks stall T7 RNA polymerases and induce untargeted transcriptional mutations

DNA-蛋白质交联阻碍 T7 RNA 聚合酶并诱导非靶向转录突变

• 发表时间: 2012
• 作者: Nakano T.;Ouchi R.,Miyamoto-Matsubara M.;Shoulkamy M.I.;Amir M.H.;and Ide H.
• 通讯作者: and Ide H.

DNA-protein crosslinks stall T7 RNA polymerase and induce untargeted transcriptional mutations

DNA-蛋白质交联阻碍 T7 RNA 聚合酶并诱导非靶向转录突变

• 发表时间: 2012
• 作者: Toshiaki Nakano;(他5名)
• 通讯作者: (他5名)

蛍光標識を用いたDNA-タンパク質クロスリンク損傷が複製ヘリカーゼの進行に及ぼす影響

使用荧光标记研究 DNA-蛋白质交联损伤对复制解旋酶进展的影响

• 发表时间: 2011
• 作者: 中野敏彰;(他5名)
• 通讯作者: (他5名)

DNA-タンパク質クロスリンク損傷が複製ヘリカーゼの進行に及ぼす影響

DNA-蛋白质交联损伤对复制解旋酶进展的影响

• 发表时间: 2011
• 作者: 中野敏彰;宮本（松原） 真由美;澤和 美菜子;石見 幸男;井出博
• 通讯作者: 井出博

蛍光標識を用いたDNA-タンパク質クロスリンク損傷の新規検出法

利用荧光标记检测 DNA-蛋白质交联损伤的新方法

• 发表时间: 2011
• 作者: Su;X.;亀山康子;吉田央;横谷明徳;中野敏彰
• 通讯作者: 中野敏彰