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婦人科癌における末梢血中腫瘍細胞からの遺伝子変異及びトランスクリプトームの解析

妇科肿瘤外周血肿瘤细胞基因突变及转录组分析

基本信息

批准号：
24390378
负责人：
井上正樹
金额：
$ 5.57万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24390378/
关键词：
末梢血中腫瘍細胞アデノウイルスベクター

项目摘要

1、テロメラーゼ特異的増殖型GFP発現型アデノウイルスベクターを用いた末梢血中腫瘍細胞(CTC)の検出本法では感染させるウイルス濃度を上げるとがん細胞の感度は上昇するが白血球への非特異的ウイルス感染によるGFP発現の増加が避けられないという問題点があったが、白血球共通抗原CD45の標識を加えることで、GFP陽性かつCD45陰性細胞をCTCとして明確に区別できるようになった。この改良により特異度が高まると共にウイルス濃度を上げることが可能になり、検出感度も高くなり、システムの有効性がかなり向上した。また観察者の経験に左右されずに客観的にCTCを判定できるようになった。これらの検出方法を応用して、本学倫理委員会の承認ならびに被験者のインフォームドコンセントのもとに婦人科癌患者の血液を用いたCTC検出実験を行った。対象は子宮頚癌、子宮体癌、卵巣癌患者であり、30～50%程度の検体でCTCが検出された。CTCの消長は治療の効果と優位に相関しており、治療効果マーカーとなりうることが明らかになった。2、CTC単離方法の確立ナノリットル単位でのマニュピレーションが可能なPicoPipet^[○!R]にて蛍光顕微鏡下でのGFP陽性細胞の単離に成功した。子宮頸がん患者において回収されたCTCからHPV遺伝子の増幅に成功した。これは原発巣と同型のHPVであり確実に末梢血から腫瘍細胞を回収できていることを示す重要なデータであり、本法の有用性を示すものと考えられた。

1. The detection of tumor cells (CTC) in peripheral blood by this method increases the concentration of GFP in the infected cells, increases the sensitivity of CTC cells to non-specific GFP infection, and increases the GFP expression in the infected cells. GFP-positive CD45-negative cells are clearly differentiated. The improvement of the specificity is higher, the concentration of the drug is higher, the sensitivity is higher, the effectiveness is higher. The inspector's right and left are the CTC's right and left The Ethics Committee of this study recognizes that CTC detection in the blood of female cancer patients is necessary. CTC was detected in 30~50% of patients with uterine cancer, uterine body cancer and ovarian cancer. CTC's treatment effect and priority are related to each other, and the treatment effect is related to each other 2, CTC separation method established by the National Institute of Technology, the National Institute of Technology, the University of Technology, the University GFP-positive cells were isolated successfully under microscope. Cervical cancer patients have been successfully treated with CTC and HPV infection. This is an important indicator of the usefulness of HPV infection in peripheral blood.