Die Bedeutung von FAT1 für die Ausbildung der Fußfortsätze und Schlitzmembran in Podozyten

FAT1对于足细胞足突和裂隙膜形成的重要性

• 批准号: 5422663
• 负责人: Professor Dr. Marcus Möller
• 金额: --
• 依托单位: Klinik für Nieren- und Hochdruckkrankheiten, Rheumatologische und Immunologische Erkrankungen (Medizinische Klinik II)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Units
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5422663?language=en
• 关键词: Die; Bedeutung; von; FAT1; die

Ziel des beantragten Vorhabens ist die Aufklärung der weitgehend unbekannten zellulären Funktion des Protocadherins FAT1, eines neu identifizierten transmembranären Proteins der glomerulären Schlitzmembran. Wie kürzlich gezeigt, führt die genetische Inaktivierung von FAT1 in der Maus zu einem massiven Defekt der Ausbildung der Fußfortsätze und der Schlitzmembran der Podozyten. Bereits vor über zwei Jahren wurden von mir während meiner Zeit als post-doctoral fellow zellbiologische Untersuchungen von FAT1 im Labor von Dr. Holzman initiiert und wertvolle Reagenzien, sowie ein Mausmodell für die genetische Manipulation von Podozyten in vivo generiert. Unsere eigenen Befunde legen nahe, daß FAT1 als transmembranäres Protein in Zellen in Kultur die gerichtete Aktinpolymerisation am leading edge von Lamellopodien und in den Filopodienspitzen reguliert. Daraus resultiert unsere Hypothese, dass FAT1 ein wichtiges Molekül bei der podozytären Fußfortsatz- und Schlitzmembranbildung darstellt, dessen Funktion wir im Detail in dem hier beantragten Vorhaben untersuchen wollen. Wir werden uns auf drei Schwerpunkte konzentrieren: 1.) Die Suche nach dem extrazellulären Liganden von FAT1, wobei wir Anhaltspunkte haben, daß Protocadherin Dachsous für eine heterophile Interaktion in Frage kommt. 2.) Die Untersuchungen der Bedeutung von FAT1 für die Zellfortsatzbildung werden sich auf eine neuartige Domäne im zytoplasmatischen Anteil von FAT1 konzentrieren, von der wir zeigen konnten, dass dessen Überexpression in Zellkultur zu einer Hypermotilität mit Zellfortsatzbildung und ektoper Aktinpolymerisation führt. 3.) In Pilotversuchen soll ein in Zellkultur bereits etabliertes lentivirales System der Genexpressions-Suppression mittels RNA-Interferenz für die Suppression spezifischer Gene des FAT1-Signalweges (FAT1, Dachsous und andere) auf die Maus übertragen werden. Damit würden auf eine relativ einfache Weise Untersuchungen der Bedeutung der einzelnen Komponenten des FAT1-Signalweges in vivo möglich.

前胶原蛋白是一种新发现的肾小球膜跨膜蛋白，它是一种未被证实的原钙粘蛋白FAT 1的功能。因此，FAT 1基因在Maus中的遗传学作用是一个非常重要的缺陷，它可以促进Fßfortsätze和Podozyten的Schlitzmembran的发展。我在两个世纪前就开始研究我的博士后研究员，在Holzman博士的实验室里对FAT 1进行了初步的研究，并进行了大量的实验，因此我建立了一个用于Podozyten体内遗传操作的模型。在传统的细胞培养中，FAT 1是一种跨膜蛋白，在片状足细胞的前沿和丝状足细胞的调节中具有较高的Aktin聚合作用。根据我们的假设，FAT 1是一种在功能性和膜生物学方面都很重要的分子，因此我们可以详细地描述FAT 1的功能。我们韦尔登我们在三个Schwerpunkte konzentrieren：1.）这些额外的FAT 1配体，我们可以通过Anhaltspunkte的方法，在Fragment中检测到一种嗜异性细胞间的原钙粘蛋白Dachsous。2.）的情况。FAT 1对Zellfortsatzbildung韦尔登的作用研究在FAT 1的抗zentrieren的酶质中建立了一个中性的酶域，通过我们的理解，在Zellkultur中表达了一个具有Zellfortsatzbildung和Ektoper Aktin聚合的超动力学。3.）第三章在Zellkultur中建立了一种基因表达抑制慢病毒系统，该系统使用RNA干扰来抑制韦尔登体内特定的FAT 1信号通路（FAT 1，Dachsous和andere）基因。Damit würden auf eine relativ einfache Weise Untersuchungen der Bedeutung der einzelnen Komponenten des FAT1-Signalweges in vivo möglich.