Untersuchungen zur Regulation der am Chlorophyll-Abbauweg beteiligten Enzyme

前体蛋白是叶绿素酶调节剂的增强和新蛋白的鉴定，它与叶绿素酶相互作用。叶绿素降解还原酶（RCCR）和脱镁叶绿素-α-加氧酶（PaO）的调节作用是叶绿素降解的主要原因。在叶绿素刺激酶的研究中，可以使用碱性磷酸酶启动子系统（AlcR/AlcA）RCCR、PaO或酶活（通过表达一个内部核糖体-Eintrittssequenz [IRES]）在转基因Pflanzen überproduziert韦尔登中表达，这是转基因Pflanzen-野生型Pflanzen或突变体的遗传学基础。在转基因韦尔登中还分析了叶绿素中间体和抗氧化酶的基因表达。通过对拟南芥进行双亲和重组（TAP），可诱导韦尔登的双亲和重组。酶促反应可刺激PaO/RCCR反应。

Ziele des Vorhabens sind die Aufklärung des regulatorischen Enzymschrittes im Chlorophyllabbau und die Identifizierung von neuen Proteine, die mit am Chlorophyllabbau beteiligten Enzymen interagieren. Regulation der Phaeophorbid-a-Oxygenase (PaO) oder der Roten-Chlorophyllkatabolit-Reduktase (RCCR) bestimmt am wahrscheinlichsten die Geschwindigkeit des Chlorophyllabbaus. Zum Nachweis des den Chlorophyllabbau stimulierenden Enzyms, sollen mittels eines alkoholinduzierbaren Promotorsystems (AlcR/AlcA) RCCR, PaO oder beide Enzyme gleichzeitig (ermöglicht durch Expression mit einer internen Ribosomen-Eintrittssequenz [IRES]) in transgenen Pflanzen überproduziert werden, die den genetischen Hintergrund der Arabidopsis-Wildtyp-Pflanzen oder der entsprechenden Mutante für je einen der beiden Enzymschritte haben. In diesen transgenen Linien werden auch Analysen der Genexpression ausgewählter Gene des Chlorophyllstoffwechsels und der antioxidativen Abwehr sowie der Chlorophyllintermediate und von Antioxidantien erfolgen. Außerdem sollen Interaktionspartner der beiden Enzyme durch die kürzlich auch für Arabidopsis beschriebene Tandem-Affinitäts-Reinigung (TAP) induziert werden. Enzymassays gaben Hinweise auf lösliche Faktoren, die die PaO/RCCR-Reaktion stimulieren.