Discovery and validation of high-performance recombinant ligands

高性能重组配体的发现和验证

• 批准号: 21K18250
• 负责人: 松本 邦夫
• 金额: $ 16.64万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K18250/
• 关键词: 細胞増殖因子; ネオバイオロジクス

細胞増殖因子は他に置き換えられない顕著な薬効をもつが、生物化学的な特性により、医薬として利用される増殖因子は一部にとどまる。私たちはHGFやMET受容体に高い親和性で特異結合する環状ペプチドを取得した（Nat Commun, 2015; Nat Chem Biol, 2019）。また、環状ペプチド配列をscaffoldタンパク質に内挿/graftすることによって、標的結合性を様々なscaffoldタンパク質に付与できることを示した（Lasso-Graft法）（Nat Commun, 2021）。一方、増殖因子受容体はダイマー化によって活性化されることから、MET結合ペプチド配列が2ヶ所内挿されたタンパク質はMET受容体のダイマー化、すなわちMET活性化能をもつ可能性がある。本研究はLasso-Graftタンパク質工学技術を用いて、超機能バイイオロジクスを取得することを目的としている。MET結合ペプチド配列（aMD4）を、ヘテロダイマータンパク質であるIgG Fc部分に内挿することによって、Fc分子内にaMD4配列が2ヶ所呈示されたFcが得られた。同分子によるMET活性化を評価した結果、HGFと同等のMET活性化能をもつことが検証された。マウスでの検討から、投与後10日を経過しても、MET活性化を引き起こす同分子の血中濃度が維持された。すなわち、HGFに匹敵するMET活性化能に加え、血中で高度に安定な“HGF-mimetic”を創成することに成功した。さらに、MET活性化はニューロン生存を促す。そこで、血液脳関門／BBBを通過することが可能なトランスフェリン抗体のFc領域にaMD4を内挿することによって、MET活性化能と同時に、脳実質内ニューロンに到達できる超機能分子を創成することに成功した（Nat Biomed Eng, 2023）。

Cell growth factors are related to other factors, including biological, biochemical, and medical factors. HGF and MET receptors have high affinity and specific binding to cyclic molecules (Nat Commun, 2015; Nat Chem Biol, 2019). The Lasso-Graft method (Nat Commun, 2021) The receptor of one or more growth factors may be activated by MET binding. This study aims at the application of Lasso-Graft technology and the acquisition of ultra-functional technologies. MET binding site alignment (aMD4) is shown in the Fc part of the molecule. The results of MET activation evaluation of the same molecule, HGF and MET activation of the same molecule were compared. MET activation was initiated 10 days after administration and blood concentrations of the same molecule were maintained. HGF-mimetic was successfully created by increasing the activity of MET and HGF in the blood. The activity of MET is promoted. In addition, it is possible to create a hyperfunctional molecule in the Fc domain of the antibody aMD4 through the passage of blood and BBB (Nat Biomed Eng, 2023).

项目成果

METの糖鎖による機能制御メカニズムの解析

糖链对MET功能调控机制分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 齋藤淳;長谷川喜弘;藤谷直樹;有木茂;上原康昭;松本邦夫;高橋素子
• 通讯作者: 高橋素子

HGF-MET系を制御する環状ペプチドの特性と応用.

控制 HGF-MET 系统的环肽的特性和应用。

• 发表时间: 2022
• 作者: Miao W; Sakai K; Sato H; Imamura R; Jangphattananont N; Takagi J; Nishita M; Minami Y; Matsumoto K;松本邦夫.
• 通讯作者: 松本邦夫.

集団遊走における細胞の機械的拘束依存的な増殖因子シグナル活性動態変化による先導細胞の運命決定.

通过生长因子信号活性动态的机械约束依赖性变化来确定集体迁移过程中主导细胞的命运。

• 发表时间: 2021
• 作者: Hiroki Sato;Katsuya Sakai;Ryu Imamura;Kunio Matsumoto.;日野直也，松田樹生也，真流玄武，酒井克也，今村龍，青木一洋，寺井健太，平島剛志，松本邦夫，松田道行.
• 通讯作者: 日野直也，松田樹生也，真流玄武，酒井克也，今村龍，青木一洋，寺井健太，平島剛志，松本邦夫，松田道行.

増殖因子受容体Metがキナーゼ活性非依存的に寄与するウイルス感染防御機構.

生长因子受体 Met 以不依赖于激酶活性的方式发挥作用的病毒感染防御机制。

• 发表时间: 2022
• 作者: 今村龍;佐藤拓輝;酒井克也;松本邦夫.
• 通讯作者: 松本邦夫.

ヒトaminopeptidase A組換えタンパク質の臓器分布および胎児移行の解析.

人氨肽酶A重组蛋白的器官分布及胎儿移植分析。

• 发表时间: 2021
• 作者: Hiroki Sato;Katsuya Sakai;Ryu Imamura;Kunio Matsumoto.;日野直也，松田樹生也，真流玄武，酒井克也，今村龍，青木一洋，寺井健太，平島剛志，松本邦夫，松田道行.;梶原健太郎，山野荘太郎，青木一洋，奥崎大介，松本邦夫，岡田雅人.;齋藤淳，長谷川喜弘，藤谷直樹，有木茂，上原康昭，松本邦夫，高橋素子.;津本彩乃，増尾友佑，近藤友美，今村龍，水谷栄彦，松本邦夫，加藤将夫.
• 通讯作者: 津本彩乃，増尾友佑，近藤友美，今村龍，水谷栄彦，松本邦夫，加藤将夫.