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NK4(HGFアンタゴニスト/血管新生抑制因子)による悪性腫瘍の治療研究

NK4（HGF拮抗剂/血管生成抑制剂）治疗恶性肿瘤的研究

基本信息

批准号：
14030049
负责人：
松本邦夫
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14030049/
关键词：
NK4 HGF 腫瘍血管新生転移浸潤遺伝子治療がん血管内皮細胞

项目摘要

悪性癌の本態というべき浸潤・転移を高効率に阻止することが癌の治癒率向上をもたらすと考えられる。私達はHGFが癌細胞の浸潤・転移を促す宿主因子であること基づき、HGFに対するアンタゴニストとして作用するNK4を調製した。その後、NK4にはHGFアンタゴニスト活性に加え、血管新生阻止能をもつ2機能性分子であることを明らかにするとともに、NK4が実験動物に移植した癌に対して、浸潤・転移を抑制するとともに、腫瘍血管新生阻害を介して癌の成長を抑制することを明らかにした。本年度はNK4による制癌研究を行う一環として、1)NK4遺伝子治療の制癌作用の解析、ならびに2)NK4による血管内皮細胞の増殖抑制に関与する細胞内情報伝達の作用点を明らかにする目的で研究を行った。NK4の生体内発現にはCMVプロモーターの下流にヒトNK4 cDNAを連結した発現カセットを有する組換えアデノウイルス(AdCMV-NK4)を使用した。Lewis肺癌細胞ならびにB16F10メラノーマ細胞を尾静脈から移植する肺転移モデルを用いてAdCMV-NK4投与の効果を調べたところ、AdCMV-NK4投与により肺転移の個数はコントロールに比べ1/10以下に強く抑制された。さらに、マウス皮下に移植されたLewis肺癌ならびにB16F10メラノーマに対しても、AdCMV-NK4を尾静脈から1回投与することにより強い成長阻害作用が認められた。一方、NK4による血管内皮細胞の増殖抑制機構を調べるため、ヒト血管内皮細胞の培養系にNK4を添加したところ、NK4はbFGFによって誘導されるERK1/2の活性化には無効であった。一方、bFGFはヒト血管内皮細胞においてGSK3-βならびにAktの活性化(リン酸化)を引き起こしたが、NK4はbFGFによって誘導されるGSK3-βならびにAktの活性化を容量依存的に抑制した。また、NK4はbFGFによって誘導されるcyclin D1の発現上昇を阻害した。以上の結果から、1)NK4遺伝子治療は転移阻害、血管新生阻害を介した癌の成長阻害をもたらす制癌法になる可能性、2)NK4の血管内皮細胞の増殖抑制に関与するシグナル伝達系はAktならびにGSK3-βを介してもたらされるcyclin D1ならびにRBリン酸化経路にあることが明らかになった。

The original state of the cancer is very high, and the cure rate is very high. HGF modulates the role of host factors in the invasion and migration of cancer cells NK4 is a functional molecule that increases HGF activity, inhibits angiogenesis, and inhibits tumor growth in animals. This year, we will carry out a series of research on NK4 gene therapy for cancer prevention, 1) analysis of the anti-cancer effect of NK4 gene therapy, 2) research on the role of NK4 gene in inhibiting proliferation of vascular endothelial cells and the role of intracellular information transmission. NK4 gene expression in vivo is linked to CMV gene expression and downstream NK4 gene expression (AdCMV-NK4). Lewis lung cancer cell line B16F10 was transplanted into the tail vein of the lung. AdCMV-NK4 was administered to the lung. The number of lung metastases was less than 1/10 of that of AdCMV-NK4. AdCMV-NK4 is a strong growth inhibitor for Lewis lung cancer. The mechanism of proliferation inhibition of vascular endothelial cells induced by NK4 and bFGF in cultured lines of vascular endothelial cells was not regulated. On the one hand, bFGF induces the activation of Akt in vascular endothelial cells, and on the other hand, bFGF inhibits the activation of Akt in vascular endothelial cells in a capacity-dependent manner. The expression of cyclin D1 was inhibited by bFGF and NK4. These results include: 1) the possibility of NK4 gene therapy to inhibit cancer growth by inhibiting migration and angiogenesis; 2) the relationship between NK4 gene therapy and inhibition of vascular endothelial cell growth by Akt3-β, cyclin D1 and RB pathway.