Effects of growth and aging on spermatogonial stem cells and its niche in rat

生长和衰老对大鼠精原干细胞及其生态位的影响

• 批准号: 22K05952
• 负责人: 中村 隼明
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05952/
• 关键词: 精子幹細胞; 移植; ラット; 宿主; ニッチ; 加齢

本研究の目的は、ラットにおいて精子幹細胞の数・活性・動態と、幹細胞を維持する微小環境 (ニッチ) の活性が、生涯を通じてどのように変化するか明らかにすることである。2022年度は、ラット精子幹細胞移植の実験系の確立と、移植に用いる宿主の評価を実施した。マウス生殖細胞を効率的に除去することができる1,4-Butanediol dimethanesulfonate (ブスルファン) の投与条件をラットにおいて検討した結果、生後2週令のオス個体に12 mg/kgを投与することで、内在性生殖細胞を最も効率的に除去することができた。しかし、この方法では、内在性の精子幹細胞がコントロール区の65％程度残存しているため、時間の経過に伴って内在性の精子形成が再生した。一方、PRDI-BF1 and RIZ homology domain containing protein 14 (Prdm14) 欠損ラットでは、支持細胞であるセルトリ細胞の数はコントロール区と比較して変化することなく、内在性生殖細胞が完全に枯渇することを明らかにした。続いて、全身で赤色蛍光タンパクを発現するRosa26-tdTomatoラット成獣由来の精巣を単一細胞に解離し、ブスルファン処理したラットあるいはPrdm14欠損ラット精巣へ移植した。その結果、移植60日後には、宿主ラット精巣においてドナー精子幹細胞に由来するtdTomato陽性のコロニーが観察された。また、精巣細胞50万個あたりのコロニー形成効率は12.8個であった。一方、胎児期の生殖細胞で特異的に発現するPrdm14遺伝子の欠損ラットについては定量的な解析は完了していないものの、コロニー形成効率がブスルファン投与ラットと比較して増加する傾向があるという予備的データが得られつつある。

本研究目的在于探讨，在体外培养的正常人精子增殖细胞数·活性·增殖能力，增殖细胞维持增殖微小环境（微环境）的活性，生鱼片通导正常人精子增殖的诱导性分化，并阐明其免疫学机制。2022年度は、ラット精子幹細胞移植の実験系の確立と、移植に用いる宿主の評価を実施した。实验动物的生长抑制率最高的去甲肾上腺素受体拮抗剂1，4-丁二酰二甲磺酸钠（1，4-Butanediamine dimethanesulfonate，1，免疫抑制，免疫方法灭活，在性痴呆子细胞内形成的淋巴结转移区中有65%程度的存活率正常，淋巴结转移少，伴淋巴结转移的内在性痴呆子形成的淋巴结再生障碍。一方，PRDI-BF1和RIZ同源结构域包含蛋白14（Prdm14）的同源重组，支持细胞增殖的细胞数量减少的细胞增殖区比正常细胞增殖的细胞增殖，内在生物性增殖细胞完全增殖的细胞增殖的细胞增殖。Rosa26-tdTomato番茄红素合成葡萄糖，因其具有一种细胞溶解活性，因此可将葡萄糖转化为葡萄糖，并可将其转化为Prdm14葡萄糖。西红柿，移植60天西红柿，西红柿精挑细选的西红柿精挑细选的西红柿精挑细选细胞，由于西红柿的毒性，西红柿精挑细选的示波器被破坏。采购、精挑细选细胞50万份申请表中，采购形成率为12.8倍。一方，胎儿期妊娠生成造血干细胞特异性的胎盘移植Prdm14胎儿生长因子定量的分析得出了胎盘移植的特异性，胎盘移植形成率高且比胎盘移植发现率高的胎盘移植给予的胎盘移植获得了高的特异性。