Elucidation of the mechanism of IL-17A receptor transport focusing on molecular motors

以分子马达为中心阐明IL-17A受体转运机制

• 批准号: 22K06440
• 负责人: 武井 陽介
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06440/
• 关键词: ミクログリア; ミクログリア活性化; 細胞内輸送機構; 分子モーター; キネシン関連タンパク; サイトカイン; IL-17A受容体; 細胞内輸送; 細胞骨格

炎症性サイトカインIL-17Aが胎児脳ミクログリアのIL-17A受容体に結合するとミクログリアが活性型に転換され、活性化に伴いミクログリアの形態や運動性は大きく変化する。このことはミクログリア活性化に細胞の『形態形成』『運動』を担う構造、すなわち細胞骨格や細胞内輸送機構が関与する可能性を示唆している。そこでミクログリア活性化の基礎となる細胞内輸送機構を解明するために、マウス胎児脳の大脳皮質からミクログリア初代培養細胞を立ち上げた。培養細胞がミクログリアマーカーを発現していることは免疫細胞化学で確認され、ミクログリア初代培養細胞が正しく作成されていることが確認された。研究実施計画に準拠し、細胞内輸送に関わる分子として、分子モーターであるキネシン関連タンパクに注目した。ヒトやマウスの細胞には50種類以上の多種多様な分子モーターが存在し微小管をレールとして細胞内輸送を行っている(Hirokawa et al., Neuron, 2010)。これらのうち、脳に存在する代表的なキネシン関連タンパクであるKIF1A, KIF1B, KIF3A, KIF3B, KIF4, KIF5A, KIF5B, KIF17等について発現を検討することにした。これらのキネシン関連タンパクがミクログリアに発現しているかどうかは道のため、メッセンジャーRNAの発現の検討をRT-PCRで最初に行う方針とした。まず、上記分子のプライマーセットを作成し、コントロール実験で特異的にメッセンジャーRNAを増幅できることを確認した。現在、ミクログリア初代培養細胞に各種プライマーセットを適用し、ミクログリア中に発現しているキネシン関連タンパクの同定と、サイトカイン刺激による発現量の変化を検討している。

Inflammatory サ イ ト カ イ ン IL - 17 a が tire where 脳 ミ ク ロ グ リ ア の IL - 17 a by let body に combining す る と ミ ク ロ グ リ ア に が activity type planning in さ れ and activeness に い ミ ク ロ グ リ ア の form や motility は big き く variations change す る. こ の こ と は ミ ク ロ グ リ ア activeness に cells の "morphogenetic" movement "を" bear う structure, す な わ bone や ち cells within the transportation agency が masato and す を る possibility in stopping し て い る. そ こ で ミ ク ロ グ リ ア activeness の based と な る intracellular delivery agency を interpret す る た め に, マ ウ ス tire where 脳 の big 脳 cortex か ら ミ ク ロ グ リ ア original culture cell を stand on ち げ た. Cultured cells が ミ ク ロ グ リ ア マ ー カ ー を 発 now し て い る こ と は immunocytochemistry で confirm さ れ, ミ ク ロ グ リ ア early generation of cultured cells is が し く made さ れ て い る こ と が confirm さ れ た. Research be applied plan に quasi 拠 し, intracellular delivery に masato わ る molecular と し て, molecular モ ー タ ー で あ る キ ネ シ ン masato even タ ン パ ク に attention し た. ヒ ト や マ ウ ス の cells に は の many many others in over 50 kinds な molecular モ ー タ ー が exist し tiny tube を レ ー ル と し て intracellular delivery line を っ て い る (Hirokawa et al., Neuron, 2010). こ れ ら の う ち, 脳 に exist す る represent な キ ネ シ ン masato even タ ン パ ク で あ る KIF1A, KIF1B, KIF3A, KIF3B, KIF4, KIF5A, KIF5B, KIF17 etc に つ い て 発 を now beg す 検 る こ と に し た. こ れ ら の キ ネ シ ン masato even タ ン パ ク が ミ ク ロ グ リ ア に 発 now し て い る か ど う か は way の た め, メ ッ セ ン ジ ャ ー RNA の 発 の now beg を 検 rt-pcr で first line に う policy と し た. ま ず, written molecular の プ ラ イ マ ー セ ッ ト を し, consummate コ ン ト ロ ー ル be 験 で specific に メ ッ セ ン ジ ャ ー RNA を rights of で き る こ と を confirm し た. Now, ミ ク ロ グ リ ア original culture cell に various プ ラ イ マ ー セ ッ ト を し, ミ ク ロ グ リ ア in に 発 now し て い る キ ネ シ ン masato even タ ン パ ク の with と, サ イ ト カ イ ン stimulus に よ る 発 amount is の variations change を beg し 検 て い る.

项目成果

The function of axon guidance molecules in dendritic morphogenesis of cortical pyramidal cells

轴突引导分子在皮质锥体细胞树突形态发生中的作用

• 发表时间: 2023
• 作者: Yoshitoku;Watabe;Tetsuya;Sasaki;Suguru;Iwata;Haruka;Kanamaru;Yohei;Soga;Yosuke;Takei
• 通讯作者: Takei

Mechanism of dendritic spine localization of myosin ld, a risk gene product for autism spectrum disorder

自闭症谱系障碍风险基因产物肌球蛋白ld的树突棘定位机制

• 发表时间: 2023
• 作者: Haruka;Kanamaru;Tetsuya;Sasaki;Suguru;Iwata;Yoshitoku;Watabe;Yohei;Soga;Yosuke;Takei
• 通讯作者: Takei

＜研究者インタビュー＞森川 桃 神経細胞内の輸送機構から脳機能や精神疾患を明らかにする―前編―

<研究员访谈>Momo Morikawa：从神经细胞内的传输机制阐明大脑功能和精神疾病 - 第 1 部分 -

光波散乱計測を用いた分散培養ニューロンの３次元形態解析システム

利用光散射测量的分散培养神经元三维形态分析系统

• 发表时间: 2023
• 作者: 岩田卓; 星野鉄哉; 根東覚; 佐々木哲也; 武井陽介; 伊藤雅英
• 通讯作者: 伊藤雅英

＜研究者インタビュー＞複数の研究室を渡り歩く上で重視すること―後編―

<研究员访谈> 在多个实验室之间移动时要考虑的事项 - 第 2 部分 -