Development of transportable scFV monoclonal antibody into nucleus

可转运的scFV单克隆抗体进入细胞核的开发

• 批准号: 22K19387
• 负责人: 山田 健人
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19387/
• 关键词: モノクローナル抗体; 核内移行; single chain Fv; がん細胞; 免疫担当細胞; scFV; 抗体薬剤複合体

モノクローナル抗体(MoAb)はバイオ医薬品の中で有望であり、抗体-薬剤複合体(Antibody-Drug Conjugate;ADC)や二重特異性抗体へ発展を遂げている。しかし、これまでMoAb自体を核内に移行させる技術はなかった。そこで本研究は、１）細胞膜から核内移行する抗原分子の探索とそのMoAb作成、２）核内移行するMoAbスクリーニング法の開発とエピトープ解析、３）免疫細胞、がん細胞での新規MoAbの核内移行とその機能解析、を行う。初年度は、細胞膜表面抗原に対するMoAbパネルおよびsingle chain Fv(scFV)ライブラリー（大腸癌、リンパ球）を用いて、細胞をMoAb処理後に核局在マーカー（核膜孔Nup98、核膜Lamin A、核スペックルSC35、核小体Fibrillarin、エンハンサー領域 RNA polymerase II）と抗原の核内共在をDuolink in situ法で解析し、核内に移行し局在する細胞膜表面抗原を選別した。その候補抗原をBaculoウイルス発現系で作出・精製しBalb/cマウスへ免疫後、黄色蛍光分子Venus付加ライブラリーを作成した。今後、scFvクローンの選別を開始し、抗原発現細胞によるCODEX technology解析により、抗原・抗体の核内共存クローンの反復選別を行う予定である。MoAbを核内まで輸送させることができれば、ADC化や二重特異性抗体化により、これまで不可能であった核内への機能抗体/分子の核移行による核酸合成阻害や修復修飾、エンハンサー機能の修飾による転写調節、核輸送の促進・阻害などが可能となると考える。

モ ノ ク ロ ー ナ ル Antibody (MoAb) は バ イ オ で in medical 薬 product の is expected to be で あ り, Antibody - 薬 tonic complex (Antibody - Drug Conjugate; ADC) や double specificity antibodies へ 発 exhibition を hence げ て い る. <s:1> させる った, った れまでMoAb, autologous を nuclear に migration させる technology, を な った った った った った った. そ こ で は, this study 1) membranes か ら nuclear internal migration す る antigen molecules の explore と そ の MoAb; and 2) nuclear internal migration す る MoAb ス ク リ ー ニ ン グ method の open 発 と エ ピ ト ー プ parsing, 3) immune cells, が ん cells で の new rules on MoAb の nuclear internal migration と そ の function parsing, う を line. Annual は, at the beginning of the cell membrane surface antigen に す seaborne る MoAb パ ネ ル お よ び single chain Fv (scFV) ラ イ ブ ラ リ ー (colorectal cancer, リ ン パ ball) を with い て, cell を MoAb 処 reason after に nuclear agency in マ ー カ ー (nuclear pore Nup98, nuclear membrane Lamin A, nuclear ス ペ ッ ク ル SC35, nucleosome Fibrillarin, エ ン ハ ン サ ー field of RNA polymerase II) と の nuclear antigen in total in を Duolink the in situ method で し, nuclear に し bureau of the transitions in す る membrane surface antigen を choose don't し た. そ の alternate antigen を Baculo ウ イ ル ス 発 department で now make, refined し Balb/c マ ウ ス へ, yellow 蛍 light after immune molecules Venus plus ラ イ ブ ラ リ ー を made し た. In the future, scFv ク ロ ー ン の began don't を し, antigen 発 now cell に よ る CODEX technology parsing に よ り, antigen, antibody, の nuclear coexist within ク ロ ー ン の line repeatedly selected don't を う designated で あ る. MoAb を intranuclear ま で conveying さ せ る こ と が で き れ ば, ADC や double specificity antibodies に よ り, こ れ ま で impossible で あ っ た intranuclear へ の functional antibody/molecular の nuclear migration に よ る nucleic acid synthesis resistance against や repair decoration, エ ン ハ ン サ ー function の modified に よ る planning write adjustment, nuclear transport の promote resistance to harm な ど が may と な る と exam え る .

项目成果

Increased alpha cell to beta cell ratio in patients with pancreatic cancer

胰腺癌患者的α细胞与β细胞比率增加

• DOI: 10.1507/endocrj.ej22-0170
• 发表时间: 2022
• 期刊: Endocrine Journal
• 影响因子: 2
• 作者: Tsuchiya Tami;Saisho Yoshifumi;Inaishi Jun;Sasaki Hironobu;Sato Midori;Nishikawa Masaru;Masugi Yohei;Yamada Taketo;Itoh Hiroshi
• 通讯作者: Itoh Hiroshi

CD26陽性がんに対する新規抗体-抗がん剤結合分子ADCの開発

开发针对CD26阳性癌症的新型抗体-抗癌药物结合分子ADC

• 发表时间: 2022
• 作者: 林 睦;間所裕子;坂元亨宇;山田健人
• 通讯作者: 山田健人

Humanized anti-IL-26 monoclonal antibody as a novel targeted therapy for chronic graft-versus-host disease

• DOI: 10.1111/ajt.17178
• 发表时间: 2022-09-09
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF TRANSPLANTATION
• 影响因子: 8.8
• 作者: Hatano, Ryo;Itoh, Takumi;Ohnuma, Kei
• 通讯作者: Ohnuma, Kei