細胞周期と細胞死のシグナル伝達阻害剤の開発とその分子作用機構

细胞周期和细胞死亡信号抑制剂的开发及其分子作用机制

• 批准号: 09256205
• 负责人: 吉田 稔
• 金额: $ 30.72万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09256205/
• 关键词: ヒストンアセチル化; トリコスタチン; トラポキシン; 核外移行シグナル; レプトマイシン; CRM1; 細胞周期; 細胞死; CDK; MAPキナーゼ; 遺伝子発現; アポトーシス; シグナル伝達; サイクリン依存症キナーゼ; 核外移行

1.昨年度までにヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)の阻害剤が高い抗腫瘍活性を示すことが示されたので、本年度は構造の多様なHDAC阻害剤の開発を目指した。酵素と共有結合することにより不可逆阻害を引き起こすトラポキシンと、HDACの活性中心亜鉛イオンと相互作用する可逆阻害剤トリコスタチンAとのハイブリッド化合物(CHAP)を合成し、その強力なHDAC阻害活性を明らかにした。さらにCHAPにおける基質アナログとなるメチレン鎖の長さやその先端の阻害基の種類を変えることにより、阻害剤構造の最適化を行った。これにより環状ペプチド骨格部分の改変による阻害剤の特異性変換のためのリード化合物が得られた。2.抗腫瘍抗生物質レプトマイシンB(LMB)の標的として同定したヒトCRM1が蛋白質核外移行シグナル(NES)の受容体であることを明らかにしたが、本年度はレプトマイシンによるCRM1機能の阻害作用の詳細を検討した。まず、分裂酵母のLMB高度耐性変異株を取得し、その耐性変異が分裂酵母Crm1の中央保存領域のCys-529がSerへ置換したものであることを明らかにした。LMBとの結合実験からCys-529がLMBとの結合に必須であること、Cys-529とLMBとの結合は、LMBの不飽和ラクトンとSH基との付加反応であり、このようなLMBとの共有結合が起こる蛋白質はin vivoではCRM1のみであることを証明した。

1. This year, the development of a wide variety of HDAC inhibitors has been demonstrated. enzyme binding, irreversible inhibition, HDAC active site interaction, reversible inhibition, and strong HDAC inhibition activity In addition, the types of the barrier elements at the top of the barrier element are changed and the structure of the barrier element is optimized. This is the first time that a chemical compound has been used in the study. 2. The target of anti-tumor antibiotic LMB is CRM1. The receptor of protein extra-nuclear migration (NES) is discussed in detail this year. The Cys-529 in the central preservation domain of the splitting yeast Crm1 was replaced by a highly tolerant variant of the splitting yeast LMB. The binding of LMB to Cys-529 is necessary, Cys-529 to LMB is necessary, LMB is unsaturated, SH group is added, LMB is co-binding, protein is in vivo, CRM1 is proved.

项目成果

K.Kasahara et al.: "Identification of preussin as a selective inhibitor for cell grocoth of the fission yeast ts mutants defective in cdcz-regnlatory genes." Journal of Antibiotics. 50. 267-269 (1997)

K.Kasahara 等人：“鉴定普鲁素作为 cdcz 调控基因缺陷的裂殖酵母 ts 突变体细胞 grocoth 的选择性抑制剂。”

Fornerod et al.: "CRM1 is an export receptor for leucine-rich nuclear export signals." Cell. 90. 1051-1060 (1997)

Fornerod 等人：“CRM1 是富含亮氨酸的核输出信号的输出受体。”

Fukuda et al.: "CRM1 is responsible for intracellular transport mediated by the nuclear export signal." Nature. 390. 308-311 (1997)

Fukuda 等人：“CRM1 负责由核输出信号介导的细胞内运输。”

Kim, Y.B. et al.: "Oxamflatin is a novel compound that inhibits mammalian histone deacetylase"Oncogene. 18. 2461-2470 (1999)

金，Y.B.

Kudo, N., et al.: "A novel nuclear export signal sensitive to oxidative stress in the fission yeast transcription factor Papl"J. Biol. Chem.. 274. 15151-15158 (1999)

Kudo, N. 等人：“裂殖酵母转录因子 Papl 中对氧化应激敏感的新型核输出信号”J.