BIOPHYSICAL STUDIES ON PROTEIN FOLDING BY MASS SPECTROMETRY

通过质谱法对蛋白质折叠进行生物物理学研究

• 批准号: 6120206
• 负责人: MICHAEL A BALDWIN
• 金额: $ 2.21万
• 依托单位: UNIVERSITY OF CALIFORNIA, SAN FRANCISCO
• 依托单位国家: 美国
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 美国
• 起止时间: 1999-03-01 至 2000-02-29
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://reporter.nih.gov/project-details/6120206
• 关键词: biological products; biomedical resource; proteins; spectrometry; structural biology

In recent years mass spectrometry has started to be used as a method to monitor the dynamics of protein folding. We will explore this aspect of MS using at least two different approaches: (i) The detection of protected protein domains by limited proteolytic isolation of protected species from SDS-PAGE gels and identification using further digestion and MALDI or ESI-MS. (ii) monitoring the kinetics of H/D exchange at physiological pH (fast exchange) followed by pepsin digestion at low pH (slow exchange) and identification of protected regions as a function of time. We will investigate the application of these techniques to biological problems, such as identification of different folds caused by mutations in the steroidogenic acute regulatory protein StAR.

近年来，质谱分析法已开始被用作分析方法。 监测蛋白质折叠动态的方法。 我们将探索 MS 的这方面至少使用两种不同的方法： (i) 通过有限的蛋白水解检测受保护的蛋白质结构域 从 SDS-PAGE 凝胶中分离受保护物种并进行鉴定 使用进一步消化和 MALDI 或 ESI-MS。 (二) 监测 生理 pH 值下 H/D 交换动力学（快速交换）如下 通过胃蛋白酶在低 pH 值（缓慢交换）下消化并鉴定 保护区作为时间的函数。 我们将调查 将这些技术应用于生物学问题，例如 识别由突变引起的不同折叠 类固醇生成急性调节蛋白StAR。