Molekulare Analyse der Diarylheptanoid-Synthase und verwandter Enzyme

生物化学与分子生物学研究项目：二芳基类庚烷的生物合成。Diese Klasse分散剂酚醛脱色剂sekundärer phflanzenstoffe快速脱色剂，z.B.姜黄素，z.B.苯基苯烯酮。生物合成技术（生物合成技术）。大北4-环丙基辅酶a （oder ein anderder Phenylpropanoyl- Starter）与聚酮合成酶III （WtPKSI aus Wachendorfia thyrsiflora）的合成。(1)蛋白质常规重组研究进展，研究zunächst研究Nachweis研究Enzymaktivität研究进展，研究(2)研究3-杂交方法研究（3- hybrid法）研究进展。Das Ziel ist die funtioneile Identifizierung des klonierten蛋白在大肠杆菌der einem anderen geeigenen表达系统中的表达，die detaillierte beestimung der enmeigenschaften sowie die Identifizierung der produckte。二烯基七烷类合成酶（也称为WtPKSI）在拟南芥中的表达[j] [j] [j] [j] [j] [j]。andere Arten是一种产七烷类化合物的植物。

Gegenstand des Projekts sind biochemische und molekularbiologische Arbeiten zur Biosynthese von Diarylheptanoiden. Diese Klasse diverser phenolischer sekundärer Pflanzenstoffe umfasst u.a. lineare, z.B. Curcuminoide, und cyclisierte Strukturen, z.B. Phenylphenalenone. Das in diesem Vorhaben interessierende Enzym katalysiert einen allen diesen Verbindungen wahrscheinlich gemeinsamen frühen Biosyntheseschritt. Dabei wird 4-Cumaroyl-CoA (oder ein anderer Phenylpropanoyl- Starter) mit einem durch eine pflanzliche Polyketidsynthase III (WtPKSI aus Wachendorfia thyrsiflora) synthetisierten Diketid verknüpft. Die geplanten Untersuchungen umfassen eine Doppelstrategie unter (1) Einsatz der konventionellen Proteinreinigung, der zunächst der Nachweis der Enzymaktivität vorausgeht, und (2) Nutzung einer 3-Hybrid-methode für den direkten Zugang zur DNA-Sequenz des interessierenden Proteins. Das Ziel ist die funktioneile Identifizierung des klonierten Proteins nach heterologer Expression in E. coli oder einem anderen geeigneten Expressionssystem, die detaillierte Bestimmung der Enzymeigenschaften sowie die Identifizierung der Produkte. Die funktioneile Expression der Diarylheptanoid-Synthase soll (als Co-Expression mit WtPKSI) auch in Arabidopsis erfolgen. Als pflanzliche Objekte sind Wurzelkulturen von Wachendorfia thyrsiflora (Haemodoraceae) und evtl. andere Arten aus DiaryIheptanoid-produzierenden Familien vorgesehen.