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Novel stress signaling pathway mediated by microtubules

Novel stress signaling pathway mediated by microtubules
微管介导的新型应激信号通路
批准号：
20H03276
负责人：
橋本 隆
金额：
$9.48万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2020-04-01 至 2023-03-31
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03276/
关键词：
乾燥ストレス微小管キナーゼフォスファターゼゼニゴケ仮根チューブリンリン酸化活性制御機構植物ストレスシグナル伝達

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项目成果

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大腸菌でPHS1（全長929aa）の断片や変異型を発現させ、チューブリンリン酸化活性と自己リン酸化活性を調べた。PHS1はキナーゼ相互作用モチーフ（KIM）を含むN末端断片（1－85）、キナーゼ触媒部位（K187）活性アミノ酸残基とチューブリン認識部位を含む中央部（86－700）、フォスファターゼ領域（86－929；活性アミノ酸残基C792）から成る。PHS1（1－700）及びPHS1（86－929）は不活性であったため、N末端領域とC末端フォスファターゼのいずれか単独でもキナーゼ活性を完全に抑制することが判明した。KIM変異PHS1（1－700）では部分的にキナーゼ活性が阻害されたことから、KIMは活性阻害モチーフであるとともに、他にも活性抑制に働くN末端領域があることが示唆された。不活性フォスファターゼ変異PHS1（86－929C792S）は部分的にキナーゼ活性を阻害したことから、フォスファターゼによるキナーゼの活性阻害は酵素活性とタンパク質相互作用の両方が関わっていることが明らかとなった。また、キナーゼ領域（86－700）とフォスファターゼ領域（701－929）を個別に発現させて反応させると、フォスファターゼ領域のモル比に応じてキナーゼ活性が阻害された。自己リン酸化活性を調べた実験では、チューブリンリン酸化活性と自己リン酸化活性は強く相関していた。ゼニゴケ葉状体を乾燥ストレスに晒すとPHS1依存的に多数の短い仮根が誘導されるため、仮根誘導転写因子RSL1とGFPの融合タンパク質をゼニゴケ細胞で発現する系統を作成した。また、仮根起源細胞を同定するために、FRH1プロモーター:YFP-NLSの発現ゼニゴケ系統も作成した。
期刊论文(8)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
高浸透圧ストレスによるチューブリンのリン酸化が阻害された変異株の選抜
高渗应激引起的微管蛋白磷酸化受到抑制的突变菌株的选择
DOI： --
发表时间： 2021
期刊：
影响因子： --
作者： [ハオ雨希, 小嶋誠司, 本間道夫, 三ツ井奨一朗, 工樂樹洋, 3.Ryutaro Ishii, 前田智恵]
通讯作者： 前田智恵
Mechanistic Insights into Plant Chiral Growth
DOI： 10.3390/sym12122056
发表时间： 2020-12
期刊： Symmetry
影响因子： --
作者： [Masayoshi Nakamura;T. Hashimoto]
通讯作者： Masayoshi Nakamura;T. Hashimoto
染色体パッセンジャー複合体の一員である SURVIVIN は収斂進化によって生じた
SURVIVIN，染色体乘客复合体的成员，通过趋同进化产生
DOI： --
发表时间： 2022
期刊：
影响因子： --
作者： [小牧伸一郎, Eelco C Tromer, Geert De Jaeger, Nancy De Winne, Maren Heese, 橋本隆, Arp Schnittger]
通讯作者： Arp Schnittger
Purification of tubulin from plant materials.
从植物材料中纯化微管蛋白。
DOI： 10.1016/bs.mcb.2020.06.002
发表时间： 2020
期刊： Molecular Cell Biology
影响因子： --
作者： [T. Hotta, and T. Hashimoto]
通讯作者： and T. Hashimoto
共 6 条
    病原性単クローン抗体作成による抗p200類天疱瘡における新規ラミニン自己抗原同定
    • 批准号：
      24K11503
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $2.91万
    • 财政年份：
      2024
    • 负责人：
      橋本 隆
    • 依托单位：
      Osaka Metropolitan University
    多角的な研究方法による抗ラミニンガンマ１類天疱瘡の自己抗体の特異性と病原性の検討
    エピジェネティクスに基づく脳の性分化メカニズムの解明
    微小管ダイナミズムのイメージング
    • 批准号：
      20061023
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $1.98万
    • 财政年份：
      2008
    • 负责人：
      橋本 隆
    • 依托单位：
      Nara Institute of Science and Technology
    海外基金