Strukturelle und funktionelle Charakterisierung der MIF/Chemokinrezeptor-Achse bei Atherosklerose und Myokardinfarkt

巨噬细胞移动抑制因子（Macrophage migration inhibitor factor，MIF）是一种多效性炎症因子，是一种免疫调节因子。病理生理学研究MIF急性和慢性进展。MIF是一种治疗动脉粥样硬化的有效药物，具有治疗动脉粥样硬化和天然动脉粥样硬化的功能。我们知道，MIF可能是趋化因子样功能（CLF）-趋化因子和非同源配体，趋化因子受体CXCR 2和CXCR 4位于CD 74的膜上，是恒定的结合物。MIF/CXCR 2（Monozyten und Neutrophile）-和MIF/CXCR 4（T-Zellen）-Achsen在动脉粥样硬化基因Gefäßwand中检测到白细胞生成。该过程也显示了CXCR 2/4-CD 74-受体复合物的异质性。配体光谱是多余的，也不是同源的化学激酶。CXCR 2是一个有前途的CXC+ Rezeptor mit，neben CXCL 8和MIF，它可以连接6个不同的配体。CXCR 4也是CXCL 12的另一个链接。CD 74与MIF和H.幽门螺杆菌尿素酶B。MIF的活性谱在同源配体中具有重要意义。我们的立场是，这是一个分子的观点，它是MIF-Rezeptor-/ nte/faces potenziell MIF-specialiste e Interventionsmoglichkeiten eröffnen。Im Mittelpunkt des Projektes soll daher eine umfassessment Struktur-Aktivitätsanalysis der Bindungs-/interfaces stehen. MIF-seitig可以通过3D-Pseudo-ELR-Motiv D44-X-R11和一个N-/OOP-类似物Motiv来识别区域结合，从而确定病理生理学相关性，这在动脉粥样硬化发生的模型中是不重要的。CXCR 2上的Rezeptorseitig scheinen vor allem der N-Terminus sowie die extrazellulären loops 1 und 2（EL 1/2）in die MIF-Bindung involviert zu sein。这是一个非常重要的问题，CD 74-Domäne和CXCR 4-Regionen für die Interaktion mit MIF verantwortlich sind and inwiefern heterooligomere Rezeptorkomplexe die Bindungs-/interfaces beeinflussen。通过对Punkt-/Deletionsmutanten、Peptiden和Rezeptorchimären的遗传学或功能性Rezeptordefizienten Zellsystemen的生物化学、生物物理学和生物学研究，以及对CXCR 7和CXCR 7的配体、分子特性的研究，解决了MIF/CXCR 2、MIF/CXCR 4和MIF/CD 74-/界面的问题。在体外、离体和体内的动脉粥样硬化模型和天然动脉粥样硬化模型中，通过对动脉粥样硬化的体外、离体和体内研究，识别出候选韦尔登区域，以确定其病理生理作用。在动脉粥样硬化的基础上，将MIF/Rezeptor-Achsen模型应用于MIF/CXCR 2和MIF/CD 74的心肌-白细胞二分模型。我们将在第二阶段研究MIF和CXCR 2、CXCR 4和CD 74的分子结构基础，研究MIF/Rezeptorachsen在心肌梗死中的作用。

Macrophage migration inhibitory factor (MIF) ist ein pleiotropes inflammatorisches Zytokin und t/psfream-Mediator der angeborenen Immunität. Pathophysiologisch verstärkt MIF akute und chronische Entzündungsprozesse. MIF ist in fortgeschrittenen atherosklerotischen Läsionen überexprimiert und hat eine wichtige funktionale Rolle bei der akzelerierten und nativen Atherosklerose. Wir konnten zeigen, dass MIF dabei als chemokine-like function (CLF)-Chemokin füngiert und als non cognate-Ligand an die Chemokinrezeptoren CXCR2 und CXCR4 sowie an CD74, die Membranform der invarianten Kette li, bindet. Die MIF/CXCR2 (Monozyten und Neutrophile)- und MIF/CXCR4 (T-Zellen)-Achsen vermitteln Leukozytenrekrutierung in die atherogene Gefäßwand. Bei diesem Prozess scheint auch heteromeren CXCR2/4-CD74-Rezeptorkomplexen eine Rolle zuzukommen. Das Ligandenspektrum vieler Chemokinrezeptoren ist redundant und umfasst auch non cognate-Chemokinliganden. CXCR2 ist ein „promisker CXC+ Rezeptor mit, neben CXCL8 und MIF, derzeit 6 weiteren bekannten Liganden. Auch für CXCR4 sind außer CXCL12 weitere Liganden bekannt. CD74 interagiert außer mit MIF mit der H. pylori Urease B. Das Aktivitätsspektrum von MIF unterscheidet sich andererseits signifikant von dem der cognate-Liganden. Wir postulieren somit, dass sich bei molekularer Kenntnis der MIF-Rezeptor-/ nte/faces potenziell MIF-spezifische Interventionsmöglichkeiten eröffnen. Im Mittelpunkt des Projektes soll daher eine umfassende Struktur-Aktivitätsanalyse der Bindungs-/nterfaces stehen. MIF-seitig konnten wir in den Vorarbeiten mit dem 3D-Pseudo-ELR-Motiv D44-X-R11 und einem N-/oop-analogen Motiv bereits Bindungsregionen identifizieren, deren pathophysiologische Relevanz es nun in Mausmodellen der atherogenen Leukozytenrekrutierung und Atherosklerose zu untermauern gilt. Rezeptorseitig scheinen bei CXCR2 vor allem der N-Terminus sowie die extrazellulären loops 1 und 2 (EL1/2) in die MIF-Bindung involviert zu sein. Es ist dagegen noch unklar, welche CD74-Domäne und welche CXCR4-Regionen für die Interaktion mit MIF verantwortlich sind und inwiefern heterooligomere Rezeptorkomplexe die Bindungs-/nterfaces beeinflussen. Insgesamt sollen die MIF/CXCR2, MIF/CXCR4 und MIF/CD74-/nterfaces durch den Einsatz von Punkt-/Deletionsmutanten, Peptiden und Rezeptorchimären sowie genetisch oder funktional rezeptordefizienten Zellsystemen mittels biochemischer, biophysikalischer und zellbiologischer Interaktionsstudien, auch im Vergleich zu den cogrnate-Liganden und CXCR7, molekular charakterisiert werden. Identifizierte candidate regions werden in Arrest- und Rekrutierungsstudien in vitro, ex vivo und in vivo in Mausmodellen der akzelerierten und nativen Atherosklerose auf ihre pathophysiologische Rolle untersucht. Während bei der Atherosklerose eine atherogen-additive Wirkung der MIF/Rezeptor-Achsen vermutet wird, soll in Mausmodellen des Myokardinfarktes der Hypothese einer myokardial-leukozytären Dichotomie für MIF/CXCR2 und MIF/CD74 nachgegangen werden. Insgesamt wollen wir in der zweiten Förderperiode die molekular-strukturellen Grundlagen der Wechselwirkung zwischen MIF und seinen Rezeptoren CXCR2, CXCR4 und CD74 im Kontext atherogener Prozesse klären und die dichotome Rolle der MIF/Rezeptorachsen beim Myokardinfarkt verstehen.