Reversible O-Phosphorylierung von Hydroxyprolin und Hydroxylysin in Proteinen

在蛋白质组学研究中，O-Phosphorylerungen、Hydroxy-L-prolin和Hydroxy-L-lysinResten被认为是一种具有生物化学活性的蛋白质。因此，我们必须改进方法，建立一种灵敏的分析方法，使之成为韦尔登。因此，我们需要合成氨基脲衍生物，并合成韦尔登肽。Diese Phosphopeptide stellen dann die Grundlage für die Entwicklung einer umfassenden Proteinanalytik mittels Chromatographie，Gelelektrophorese，Aminosäureanalytik，Edman-Abbau，Massenspektrometrie und spezifischer Antikörper dar.该灵敏度高的质谱法提供了鉴定韦尔登中磷酸化羟脯氨酸和羟脯氨酸的中心方法。一个磷酸化羟化酶或一个磷酸化羟化酶的蛋白质中的一个片段，可以通过序列分析来确定韦尔登的位置。一种磷酸化蛋白质对蛋白质的结构和功能有重要影响。我们可以通过韦尔登鉴定。除了生产出具有高特异性和灵敏度的抗菌剂外，还需要将磷酸化的蛋白质引入到受感染的韦尔登和器官中。

Der vorliegende Antrag hat das Ziel, bisher wenig untersuchte O-Phosphorylierungen an Hydroxy-L-prolin- und Hydroxy-L-lysinResten in Proteinen zu identifizieren sowie deren biochemische Bedeutung zu entschlüsseln. Dazu müssen zunächst grundlegende Methoden, insbesondere eine sensitive Analytik, entwickelt werden. Aufbauend auf unseren Vorarbeiten sollen die nötigen Aminosäurederivate synthetisiert und die Synthese der Phosphopeptide etabliert werden. Diese Phosphopeptide stellen dann die Grundlage für die Entwicklung einer umfassenden Proteinanalytik mittels Chromatographie, Gelelektrophorese, Aminosäureanalytik, Edman-Abbau, Massenspektrometrie und spezifischer Antikörper dar. Die sehr sensitive Massenspektrometrie verspricht die zentrale Methode zur Identifizierung phosphorylierter Hyp- und Hyl-Rese in Proteinen zu werden. Sobald in einem Protein ein Phospho-Hyp oder eine Phospho-Hyl identifiziert wird, kann mittels Sequenzanalyse die genaue Position bestimmt werden. An diesem Protein wird dann der Einfluß der Phosphorylierung auf die Struktur und die Funktion des Proteins untersucht. Ferner soll die beteiligte Kinase identifiziert werden. Besitzen die produzierten Antikörper eine ausreichend hohe Spezifität und Sensitivität, soll das Phosphorylierungsmuster des ausgewählten Proteins in verschiedenen Geweben und Organen untersucht werden.