Adenoviral vermittelte RNA-Interferenz in Kardiomyozyten

RNA Interferenz(RNAi)reprräsentiert einen进化är konservierten Machismus，der den Abbau von mRNAs veruracht，well che同源物Nukletidequenzen zu Kurzen(约22个核苷酸)双链RNAs(小干扰RNA，siRNA)aufweisen。Der GenSpezifische Abbau von mRNA Mittels siRNA reprräsentiert eine Innovation Technik，Durch die es möglich ist，eine Vielzahl von Funktionellen Genomanalysen im Hinblick auf生理学和病理生理学。在Verschiedensten Zellypen konnte die genSpezifische Zerstörung von mRNA mittels siRNA中，nachgewiesen被发现。Bisher认为有丝分裂后的心脏肌酶和神经元是一种死亡系统。在成年的卡迪安·米奥兹滕中，所有的人都有自己的生活方式和方式。达成年人Myozyten einem Gentry Transfer MIT Hilfe Nichht-Viraler Vektoren Nur Schww Zugänglich Sind，Sollen die siRNA-Moleküle duch ein in腺病毒系统Transkribiert。大足已经完成了所有的工作，因此，我们的工作就是把所有的工作都做好了。每一台机器的演示都是针对他们定义的功能和方法，嗯是功能和蛋白质在Einem Kurzen Signalweg zu untersuchen。使用实时定量聚合酶链式反应-分析技术验证蛋白质的真实性。Funktionelle Konequenzen der Verringerten von RGS Proteinen is den MIT Hilfe von Patch Chocket Messungen des GIRK Stromes untersuht，Dessen Aktivierung einenäuüerst敏感度在线分析Für kintische Eigenschaften des G-Protein Zyklus der Gi/o-Klasse Bieten。

RNA Interferenz (RNAi) repräsentiert einen evolutionär konservierten Mechanismus, der den Abbau von mRNAs verursacht, welche homologe Nukleotidsequenzen zu kurzen (ca. 22 nt) doppelsträngigen RNAs (small interfering RNA, siRNA) aufweisen. Der genspezifische Abbau von mRNA mittels siRNA repräsentiert eine innovative Technik, durch die es möglich ist, eine Vielzahl von funktionellen Genomanalysen im Hinblick auf physiologische und pathophysiologische Fragen durchzuführen. In verschiedensten eukaryontischen Zelltypen konnte die genspezifische Zerstörung von mRNA mittels siRNA, nachgewiesen werden. Bisher nicht untersucht ist dieses System an postmitotischen Kardiomyozyten und Neuronen. Hauptziel des beantragten Vorhabens ist die Etablierung einer Methode zur Expression von siRNA zur gezielten Genausschaltung in adulten kardialen Myozyten. Da adulte Myozyten einem Gentransfer mit Hilfe nicht-viraler Vektoren nur schwer zugänglich sind, sollen die siRNA-Moleküle durch ein adenovirales System transkribiert werden. Dazu werden etablierte virale Vektoren so verändert, dass die siRNA Transkription über Promotoren erfolgt, welche die Expression von kurzen RNA Stücken unterstützen. Nach Demonstration der Machbarkeit am Beispiel eines targets mit einer definierten Funktion soll die Methode eingesetzt werden, um die Funktion von RGS-Proteinen in einem kurzen Signalweg zu untersuchen. Der Rückgang der jeweiligen mRNA wird über quantitative real-time PCR-Analysen bzw. bei Verfügbarkeit von Antikörpern auf Proteinebene verifiziert. Funktionelle Konsequenzen der verringerten Expression von RGS Proteinen werden mit Hilfe von Patch clamp Messungen des GIRK Stromes untersucht, dessen Aktivierung/Deaktivierung einen äußerst sensitiven online assay für kinetische Eigenschaften des G-Protein Zyklus der Gi/o-Klasse bieten.