Vorkommen, Regulation und transportphysiologische Bedeutung einer vakuolären H+-ATPase im Pansenepithel von Schaf und Rind

Das geplante forschungsvohaben dient der Charakterisierung eines bei pan - enepithelial zellen (PEZ) bisher - nicht beschriebenen transportprotein， der H+- atp酶vom vakuolären type （vH+- atp酶）。在免疫化学，Western-Blot和RT-PCR的基础上，研究了h +- atp酶在免疫化学中的应用。[1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1]。Ferner soler3 funktionelle Bedeutung in zuusammenhang mit Transport on electrolyten， bederderausbildung von chemischen and elektrischen Gradienten和bedermamemembren， bederderpassung and wechselnde extrazelluläre bedingungendefiniert werden。Veränderungen der表达bzw vH+- atp酶的定位sollen mittels RT-PCR，免疫印迹和免疫酶bzw。免疫组织化学。在功能性研究中，荧光光谱分析方法与测定方法intrazellulärer离子浓度（Mg2+, Ca2+, Na+, H+） bzw。[3] [j] .膜电位工程学报，[j] .微系统学报。

Das geplante Forschungsvorhaben dient der Charakterisierung eines bei Pansenepithelzellen (PEZ) bisher nicht beschriebenen Transportproteins, der H+-ATPase vom vakuolären Typ (vH+-ATPase). Die Existenz einer vH+-ATPase bei diesem Zelltyp konnte in Vorversuchen mit verschiedenen Methoden (funktionelle Studien mit Hemmstoffen, Immunzytochemie, Western-Blot und RT-PCR) nachgewiesen werden. Im Rahmen des geplanten Forschungsvorhabens sind Experimente zur Aufklärung der Regulation dieser vH+-ATPase vorgesehen. Ferner soll ihre funktionelle Bedeutung im Zusammenhang mit dem Transport von Elektrolyten, bei der Ausbildung von chemischen und elektrischen Gradienten an der Plasmamembran sowie bei der Anpassung an wechselnde extrazelluläre Bedingungen definiert werden. Veränderungen der Expression bzw der Lokalisation der vH+-ATPase sollen mittels RT-PCR, Immunoblot und Immunozyto bzw. Immunohistochemie nachgewiesen werden. In funktionellen Studien werden fluoreszenzspektroskopische Methoden zur Bestimmung intrazellulärer Ionenkonzentrationen (Mg2+, Ca2+, Na+, H+) bzw. des Membranpotentials eingesetzt, sowie Messungen des Sauerstoffverbrauches im Mikrosystem durchgeführt.