The role of PDK1-FoxO signaling pathway in the development of podocyte injury

PDK1-FoxO信号通路在足细胞损伤发生中的作用

• 批准号: 21K08243
• 负责人: 伊藤 恵実
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Center for Global Health and Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08243/
• 关键词: 糖尿病性腎臓病; 糸球体上皮細胞

糖尿病性腎症は透析導入疾患第一位であり、その成因を分子機序で解明し治療法や予防法を構築することは重要な課題である。研究2年度はPDK-1欠失により引き起こされる糸球体上皮細胞障害の機序解明を試みることを目的にタモキシフェン誘導型糸球体上皮細胞特異的PDK-1ノックアウトマウス(iPod-PDK1 KO)を作製した。iPod-PDK1 KOマウスは糸球体上皮細胞特異的タモキシフェン誘導性CreトランスジェニックマウスとPDK-1-floxマウスとの交配により作製した。さらにiPod-PDK1 KOマウスの腎機能評価のためにiPod-PDK1 KOマウスにタモキシフェンを投与し、タモキシフェン投与後の尿中アルブミン量、アルブミン・クレアチニン比(ACR)を経時的に測定した。タモキシフェン投与後4週以降のiPod-PDK1 KOマウスのACR、尿中アルブミン量は、いずれも対照マウスに比べて上昇していた。加えてタモキシフェン投与後24週のiPod-PDK1 KOマウス腎臓では、糸球体硬化病変の形成や尿細管腔の拡張、尿円柱が観察された。引き続きiPod-PDK1 KOマウスの腎機能評価を継続する。同様に、PDK-1欠失により引き起こされる糸球体上皮細胞障害におけるFoxOの関与を検討する目的で、PDK-1、FoxOの両遺伝子を欠失するタモキシフェン誘導型糸球体上皮細胞特異的PDK-1/FoxOノックアウトマウスの作製を開始した。また、糸球体上皮細胞の性状解析のためにPDK-1を欠失する初代培養糸球体上皮細胞の調製に関する条件検討を開始した。

糖尿病性肾病是引发透析的第一疾病，这是通过分子机制来阐明其起源并建立治疗和预防方法的重要问题。在研究的第二年中，制备了他莫昔芬诱导的肾小球上皮细胞特异性PDK-1基因敲除小鼠（iPod-PDK1 KO），目的是阐明肾小球上皮细胞诱导的缺乏的机制。 iPod-PDK1 KO小鼠是通过用PDK-1-蛋白酶小鼠配合肾小球上皮细胞特异性的他莫昔芬诱导的Cre trengenic小鼠而产生的。此外，为了评估iPod-PDK1 KO小鼠的肾功能，对ipod-pdk1 KO小鼠的施用了他莫昔芬，并且在尿液中测量了他莫昔芬后在尿液中测量尿液中的白蛋白和白蛋白 - 造克丁氨酸比率（ACR）的量。与对照小鼠相比，在他莫昔芬给药后4周后，iPod-PDK1 KO小鼠的ACR和尿白蛋白水平都增加了。此外，在他莫昔芬给药后24周，在iPod-PDK1 KO小鼠的肾脏中，观察到肾小球硬化病变，扩张的管腔空间和尿缸。我们将继续评估iPod-PDK1 KO小鼠中的肾功能。同样，我们开始产生他莫昔芬诱导的肾小球上皮细胞特异性PDK-1/FOXO基因敲除小鼠，这些小鼠均删除了PDK-1和FOXO基因，目的是研究FOXO参与肾小球上皮细胞诱导的PDK-1 DELETION引起的肾小球上皮细胞诱导的损伤。此外，我们已经开始研究缺乏PDK-1的原代肾小球上皮细胞的准备条件，以分析肾小球上皮细胞的性质。

项目成果

国立国際医療研究センター 研究所 糖尿病研究センター 臓器障害研究部

国家全球健康与医学中心研究所糖尿病研究中心器官疾病研究部

2型糖尿病患者における推算糸球体濾過量（eGFR）漸減関連因子の探索

寻找与 2 型糖尿病患者估计肾小球滤过率 (eGFR) 逐渐下降相关的因素

• 发表时间: 2022
• 作者: 久保田浩之;伊藤恵実;平野大志;今澤俊之;梶尾裕;山下滋雄;深澤由香;関直人;鏑木康志
• 通讯作者: 鏑木康志