Experimentelle Modulation der Telomerase-Aktivität in bovinen Embryonen

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In der laufenden Förderperiode wurden mit einer neuen, im Labor der Antragssteller entwickelten Plasmid-Injektionstechnik humane Telomerase, humane Telomerase-RNA sowie ein Fluoreszenzprotein zuverlässig in Rinderembryonen ko-exprimiert. Sowohl die Expression des humanen Telomerase-Holoenzyms, als auch die Expression der Telomerase-Untereinheiten resultierten in einer signifikanten Verlängerung der bovinen Telomeren. Parallel dazu konnte gezeigt werden, dass es während der frühen Präimplantationsphase zu einer differentiellen Telomerenverlängerung in Zellen der Inneren Zellmasse (ICM) und des Trophektoderms kommt, die zudem spezies-spezifisch unterschiedlich ausgeprägt ist. Das beantragte Folgeprojekt hat zum Ziel, diese in vitro Ergebnisse zu vertiefen und nach stabiler Integration der humanen Telomerase im bovinen Genom, die Auswirkungen auf die in vivo Entwicklung zu studieren. Dazu wird die humane Telomerase mittels Transposon-Transposition stabil in das Rindergenom integriert. Transgene Blastozysten werden auf Empfängertiere übertragen; Feten (am Tag 30 der Embryogenese) und Kälber werden in ihrer Entwicklung im Detail analysiert. Diese Untersuchungen sollen das Rind als ein Modell zum Studium der Telomerenfunktion in verschiedenen biologischen Prozessen wie Seneszenz und Tumorbildung etablieren.