腫瘍細胞選択的アポトーシスによる内分泌系悪性腫瘍の遺伝子治療の開発

利用肿瘤细胞选择性凋亡开发内分泌系统恶性肿瘤基因治疗

• 批准号: 08770808
• 负责人: 川上 康
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770808/
• 关键词: 甲状腺癌; アポトーシス; 遺伝子治療

内分泌系腫瘍は産生ホルモンが臓器特異的であるため、アポトーシス誘導遺伝子を特異的ホルモンのプロモーターとともに導入すれば、臓器特異的な遺伝子発現をおこなうことが可能である。臓器特異的なプロモーターとして、サイログロブリン遺伝子プロモーター領域を用いて、アデノウイルスベクターを用いて導入した際に、臓器特異性が維持されるかを検討した。その結果、従来報告されていた範囲のプロモーター領域では非甲状腺細胞においてもプロモーター活性が生じてしまうことがルシフェラーゼ解析により判明した。そこでサイログロブリン遺伝子上流領域を広くクローニングして解析した結果、従来報告された部分よりさらに上流に臓器特異性をさらに厳密に決定する調節領域が存在することを発見した。培養系においてヒト甲状腺癌細胞、ヒト甲状腺正常細胞、対照としてヒト肝細胞株(Hep G2)、ヒト線維芽細胞株に上記プロモーターとともにアデノウイルスベクターによりマウスFAS遺伝子を導入した結果、甲状腺細胞にFASが選択的に発現し、抗FAS抗体添加により選択的にアポトーシスへと誘導できた。ヒト甲状腺手術検体におけるサイログロブリンプロモーター活性はサイクログロブリン濃度が検出感度以下のものでも存在した。これらの腫瘍から樹立した初代培養細胞をヌードマウスに移植し、FAS遺伝子導入後、抗FAS抗体を投与した結果、腫瘍選択的にアポトーシスを惹起しえた。以上の結果はFAS遺伝子導入による甲状腺癌モデル動物の遺伝子治療が可能であることを示した。今後、安全性の問題が確認されればホルモン産生臓器由来の悪性腫瘍の遺伝子治療法として臨床応用が可能であると考えられる。

Endocrine tumors produce organ-specific genes, which can induce gene expression. When the device-specific information is introduced, the device-specific information is maintained. The results of this study were reported in the context of the analysis of non-thyroid cell activity. The results of the analysis of the upstream domain of the upstream domain of Culture lines include thyroid cancer cells, thyroid normal cells, liver cell line (HepG2), thyroid germ cell line, FAS gene introduction results, FAS gene detection in thyroid cells, anti-FAS antibody addition, FAS gene detection and induction in thyroid cells. Thyroid surgery is the most common cause of thyroid cancer. After the initial culture, the FAS gene was introduced, and the anti-FAS antibody was injected. These results indicate that FAS gene therapy is possible in thyroid cancer patients. In the future, safety issues will be identified in the study of possible clinical use of genetic therapies for the treatment of tumors from which drugs are produced.

项目成果

Y.Kawakami: "VEGF is upiegulatd by high glucose concentration and acute depriration in pigmented cell in the retircl tissue" Biochem Biophys.Res.Comm.287. 741-746 (1996)

Y.Kawakami：“VEGF 因高葡萄糖浓度和视网膜组织中色素细胞的急性缺失而升高”Biochem Biophys.Res.Comm.287。

Y.Kawakami: "Intracellular Fatty Acid Down-Regulatc ob(obese)gere expression in 3T3-L1 adipocytes" J.Biol:chem. 272. 456-463 (1997)

Y.Kawakami：“3T3-L1 脂肪细胞中细胞内脂肪酸下调表达”J.Biol：chem。