小胞体の品質管理に寄与する分子シャペロンと基質蛋白の糖鎖プロセッシングの重要性

分子伴侣和底物蛋白聚糖加工对内质网质量控制的重要性

基本信息

批准号：
10780388
负责人：
徳永文稔
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Himeji Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

近年、小胞体内の折りたたみ異常蛋白質は、分子シャペロンにより識別され、細胞質へ逆行輸送後、ユビキチン・プロテアソームにより分解されることが明らかになり、この機構は小胞体関連分解と呼ばれる。我々は、血液凝固制御因子であるプロテインCは抗血栓薬(ワルファリン)下でγ-カルボキシル化不全になると小胞体関連分解されることを明らかにしている。また、その過程においてプロテインC糖鎖のマンノーストリミングが分解の引き金として重要であることを見いだした。本研究では、プロテインCの小胞体関連分解における糖鎖のプロセシングの重要性を調べる目的で、まずツニカマイシン処理により糖鎖を除去したプロテインCの小胞体関連分解を調べた。その結果、糖鎖のないプロテインCは細胞内で分解されるものの、プロテアソーム阻害剤存在下でも分解が阻止されないことを見いだした。これは、糖鎖を除去したプロテインCは別経路による分解される可能性を示唆している。また、プロテインC中の4箇所(97番、248番、313番、329番)のうち、生理的に欠失がみられる329番をGlnに固定し、他の3箇所をそれぞれGlnに置換した2Q変異体を用いて、分泌や小胞体関連分解に影響する糖鎖を調べたところ、Asn97→Gln変異体ではビタミンK存在下でも分泌障害になることが明らかになった。また、マンノーストリミングを阻止するキフネンシン存在下での小胞体関連分解阻害効果がAsn313欠失体では小さいことから、97番糖鎖はプロテインCの分泌に重要で、313番のマンノーストリミングが小胞体関連分解のトリガーとして重要であると結論した。

最近，已经揭示了内质网中内部网状蛋白的折叠异常蛋白质通过分子伴侣鉴定，并在逆行转运后被泛素蛋白酶体降解为细胞质，该机制称为内质网相关的下降效果。我们已经表明，当γ-羧基化不足（WARFARIN）时，蛋白C（一种血液凝血调节剂）被内质网降解。在此过程中，我们还发现蛋白质C糖链的Manno流是降解的触发因素。在这项研究中，我们首先研究了聚糖加工在蛋白C内质网相关降解中的重要性，蛋白C已通过衣霉素治疗去除。结果，尽管无糖链的蛋白质C被细胞内降解，但发现即使在存在蛋白酶体抑制剂的情况下，降解也不会阻塞。这表明已经从糖链中去除的蛋白C可能会因不同的途径而降解。此外，在蛋白质c（第97号，第248号，第313号和第329号）中的四个位置中，在生理上删除，将其固定在GLN上，而其他三个地点被GLN替换为GLN，以及Glln替换了GLN，并且均导致分泌和腹膜降解的eNgrAD7也被揭示了→GLN均被揭示的eNgrAD 7，并被揭示了该物体，并被揭示了这一并被揭示的是，它是该杂物的均被揭示的。即使在存在维生素K.的存在下，分泌损害也是由于抑制性网状抑制作用在kifnensin存在下阻止甘露糖脱水的抑制作用在ASN313缺失中很小，我们在Glycan 97中很重要，对于蛋白质c cys and MannoStreams at 313很重要网状相关降解。