炎症性疾患の治療を目指したポリユビキチン鎖生成の高感度リアルタイム検出法の開発

开发用于治疗炎症疾病的多聚泛素链生成的高灵敏实时检测方法

• 批准号: 19657035
• 负责人: 徳永 文稔
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Osaka University (2008)Osaka City University (2007)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19657035/
• 关键词: 酵素; 細胞・組織; 蛋白質; バイオテクノロジー

ユビキチンは真核生物に高度に保存された低分子量(8.6kDa)タンパク質であり、E1、 E2、 E3の3種の酵素反応によって標的タンパク質のLys残基に結合される。さらに、ユビキチン内のLys残基を介してユビキチンが連続的に結合されることにより、標的タンパク質がポリユビキチン化される。このようなポリユビキチン鎖には、タンパク質分解シグナルとなるLys48結合型や、分解シグナルとしては機能しないもののシグナル伝達やDNA修復などに関与するLys63型などが見いだされていた。我々はこれまでのポリユビキチン鎖形成の概念を凌駕するユビキチンのN末端α-アミノ基を介する直鎖状ポリユビキチン鎖を形成するユビキチンリガーゼを同定したので、直鎖状ポリユビキチン鎖の生成を特異的に検出する方法開発を行った。その結果、本研究課題として昨年度作製した直鎖状ポリユビキチン鎖に対するペプチド抗体のうち、ユビキチンのC末端6残基とN末端6残基を2回含む24-merのペプチド抗体が直鎖状ポリユビキチン鎖を検出可能な抗体であることが解った。さらに、同抗体にて炎症性サイトカイン(IL-1β)刺激によって細胞内で内在性のNEMO(NF-κB essential modulator, IKKγ)が直鎖状ポリユビキチン化されることを検出した。これらの研究成果はNature Cell Biology誌に発表し、同誌のNews and Views、Nature Review Molecular Biology誌のHighlight、Science Signaling誌のEDITOR'S CHOICEにて紹介されるなどの反響を得ている。

ユ ビ キ チ ン は eukaryotes に highly に save さ れ た low molecular weight (8.6 kDa) タ ン パ ク qualitative で あ り, E1, E2 and E3 の three の enzyme reverse 応 に よ っ て mark タ ン パ ク qualitative の Lys residue に combining さ れ る. Within さ ら に, ユ ビ キ チ ン の Lys residue を interface し て ユ ビ キ チ ン が even 続 に combined さ れ る こ と に よ り, mark タ ン パ ク qualitative が ポ リ ユ ビ キ チ ン change さ れ る. こ の よ う な ポ リ ユ ビ キ チ ン lock に は, タ ン パ ク qualitative decomposition シ グ ナ ル と な る Lys48 type combined with や, decomposition シ グ ナ ル と し て は function し な い も の の シ グ ナ ル 伝 da や DNA repair な ど に masato and す る Lys63 type な ど が see い だ さ れ て い た. I 々 は こ れ ま で の ポ リ ユ ビ キ チ concept formation の ン lock を above す る ユ ビ キ チ ン の N terminal alpha ア ミ ノ base を interface す る straight lock ポ リ ユ ビ キ チ ン lock を form す る ユ ビ キ チ ン リ ガ ー ゼ を with fixed し た の で, straight lock ポ リ ユ ビ キ チ ン lock の generated を specific に 検 out す る method open 発 を line っ た. そ の results, this research topic と し て yesterday the annual cropping し た straight lock ポ リ ユ ビ キ チ ン lock に す seaborne る ペ プ チ ド antibody の う ち, ユ ビ キ チ ン の C terminal 6 residues と N terminal residue を 2 back to contain む 24 - killing の ペ プ チ ド antibody が straight locks ポ リ ユ ビ キ チ ン lock を 検 で may な antibodies あ る こ と が solution っ た. さ ら に, with antibody に て inflammatory サ イ ト カ イ ン (IL - 1 beta) stimulation に よ っ て in cells で internality の NEMO (nf-kappa B essential modulator, IKK gamma) が straight lock ポ リ ユ ビ キ チ ン change さ れ る こ と を 検 out し た. Youdaoplaceholder6 れら <s:1> research results に Nature Cell Biology に published に, gay <s:1> News and Views, Nature Review Molecular Biology <s:1> highlights, Science Signaling: EDITOR'S CHOICEにて Introduction されるな <s:1> を response を て る る.

项目成果

LUBACュビキチンリガーゼによるNEMOの直鎖状ポリュビキチン化修飾とNF-kB活性化の分子機構

LUBAC联聚蛋白连接酶线性多聚联蛋白化修饰NEMO和NF-kB激活的分子机制

• 发表时间: 2008
• 作者: Zenke-Kawasaki;Y;et. al.;徳永文稔
• 通讯作者: 徳永文稔

Heme induces ubiquitination and degradation of the transcription factor bach1

• DOI: 10.1128/mcb.02415-06
• 发表时间: 2007-10-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Zenke-Kawasaki, Yukari;Dohi, Yoshihiro;Igarashi, Kazuhiko
• 通讯作者: Igarashi, Kazuhiko

大阪大学大学院生命機能研究科研究成果

大阪大学研究生院先端生命科学研究生院研究成果

Involvement of linear polyubiquitylation of NEMO in NF-kB activation

NEMO 线性多泛素化参与 NF-kB 激活

• 发表时间: 2009
• 期刊: Nature Cell Biology 11
• 作者: Tokunaga;F.;et al.
• 通讯作者: et al.

大阪大学大学院医学系研究科主要成果

大阪大学医学研究科的主要成果