品質管理機構の担い手としての小胞体内シャペロンの解析

内质网伴侣作为质量控制机制的分析

• 批准号: 10172227
• 负责人: 徳永 文稔
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Himeji Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10172227/
• 关键词: 小胞体関連分解; 小胞体の品質管理機構; プロテアソーム; 分子シャペロン; カルネキシン; カルレティキュリン; 小胞体マンノシダーゼ; チログロブリン

cogマウスは、チログロブリン(Tg)のC末端アセチルコリンエステラーゼ様ドメイン内にLeu2263→Pro変異をもつため分泌異常となり、異常Tgが小胞体に蓄積し、BiP.ERp72、ER60、カルレティキュリンなどの小胞体シャペロンを誘導するとともに先天性甲状腺腫を引き起こすことが知られている(Kim PS,et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95,9909,1998)。本研究で我々は、CHO細胞においてcog型Tgを発現させ、その分泌異常の細胞機構を調べた。パルスチェイス解析の結果、cog型Tgは半減期6時間で細胞内分解されることが示された。この分解はプロテアソーム阻害剤のほかキフネンシンなど小胞体マンノシダーゼIの阻害剤やシクロへキシミドなどタンパク質合成阻害剤の添加によって阻止された。しかし、カルネキシン・カルレティキュリンなど小胞体のレクチン様シャペロンとの会合を阻止するグルコシダーゼ阻害剤(カスタノスペルミン)は、cog型Tgの細胞内分解に影響を与えなかった。また、免疫沈降によってもcog型Tgとこれらシャペロンとの会合は検出されず、cog型Tgの品質管理はカルネキシン・カルレティキュリン以外のシャペロンによって行われる可能性が高い。さらに、細胞内でのマンノースレクチンとして知られるERGIC-53とcog型Tgとの会合も見られなかった。これらの知見はcog型Tgのタンパク質部分での折りたたみ異常とN型糖鎖のMan9型からMan8B型へのマンノーストリミングが異常タンパク質の細胞内分解において重要なシグナルになることと、品質管理の認識機構に重要な新規Man8B型認識レクチンの存在を示唆している。

Cog マ ウ ス は, チ ロ グ ロ ブ リ ン (Tg) の C terminal ア セ チ ル コ リ ン エ ス テ ラ ー ゼ others ド メ イ ン within に Leu2263 - Pro - vision を も つ た め secretion abnormal と な り, abnormal Tg が small cell body に accumulation し, BJP. ERp72, ER60, カ ル レ テ ィ キ ュ リ ン な ど の small cell body シ ャ ペ ロ ン を induction す る と と も に congenital goiter を lead き up こ す こ と が know ら れ て い る (Kim PS, et al. Proc. Natl. Acad tools. Sci. USA 95990, 9199, 8). This study で I 々 は, CHO cells に お い て cog type Tg を 発 now さ せ, そ の secretion abnormal の cell agency を adjustable べ た. Youdaoplaceholder0 スチェ スチェ ス ス ス analysis of the <s:1> results, cog-type Tg <s:1> half-reduction period 6 time で intracellular decomposition される とが とが とが shows された. こ の decomposition は プ ロ テ ア ソ ー ム resistance against tonic の ほ か キ フ ネ ン シ ン な ど small cell body マ ン ノ シ ダ ー ゼ I の resistance against tonic や シ ク ロ へ キ シ ミ ド な ど タ ン パ ク quality synthetic resistance against tonic の add に よ っ て stop さ れ た. し か し, カ ル ネ キ シ ン · カ ル レ テ ィ キ ュ リ ン な ど small cell body の レ ク チ ン others シ ャ ペ ロ ン と meet の を stop す る グ ル コ シ ダ ー ゼ resistance against tonic (カ ス タ ノ ス ペ ル ミ ン) は, cog Tg の cell decomposition に influence を and え な か っ た. ま た, immune sink に よ っ て も cog type Tg と こ れ ら シ ャ ペ ロ ン と meet の は 検 out さ れ ず, cog Tg の quality management は カ ル ネ キ シ ン · カ ル レ テ ィ キ ュ リ ン outside の シ ャ ペ ロ ン に よ っ て line わ れ が high い る possibilities. さ ら に, intracellular で の マ ン ノ ー ス レ ク チ ン と し て know ら れ る ERGIC - 53 と cog type Tg と meet の も see ら れ な か っ た. こ れ ら の knowledge は cog type Tg の タ ン パ ク qualitative part で の fold り た た み abnormal と N sugar の lock type Man9 か ら Man8B type へ の マ ン ノ ー ス ト リ ミ ン グ が abnormal タ ン パ ク qualitative の cell decomposition に お い て important な シ グ ナ ル に な る こ と と, quality management の institutions に important new rules Man8B な know レ ク チ ン The existence of を indicates て て る る.

项目成果

Shigekiyo,K.: "HRG Tokushima: molecular and cellular characterization of histidine-rich glycoprotein (HRG) deficiency" Blood. 91・1. 128-133 (1998)

Shigekiyo，K.：“HRG Tokushima：富含组氨酸的糖蛋白（HRG）缺乏的分子和细胞特征”血液91・1（1998）。

Kondo,S.: "Factor XII Tenri, A novel cross-reacting material negative factor XII deficiency, occurs through a proteasome-mediated degradation" Blood. (印刷中).

Kondo, S.：“因子 XII Tenri，一种新型交叉反应物质阴性因子 XII 缺陷，通过蛋白酶体介导的降解发生”血液（正在出版）。

Shirotani,H.: "Cellular and functional characterization of three recombinant antithrombin mutants that caused pleiotropic effect-type deficiency" J.Biochem.(Tokyo). 125・2. 253-262 (1999)

Shirotani, H.：“引起多效性效应型缺陷的三种重组抗凝血酶突变体的细胞和功能特征”J.Biochem.（东京）125・2（1999）。