新規NKレセプターの遺伝子クローニングと会合分子の解析

新型NK受体基因克隆及相关分子分析

• 批准号: 11770176
• 负责人: 反町 典子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770176/
• 关键词: NK細胞; CD94; Ly-49; NKレセプター; マウス; モノクローナル抗体; 遺伝子クローニング; 抑制性レセプター

本研究はNK細胞の標的認識に関わる新規レセプターの遺伝子クローニングと会合分子の解析を目的として行った。これまでに、幾つかの異なるアプローチからNKレセプターの同定を試みた。(1)NK細胞の細胞傷害活性に影響を与える新規モノクローナル抗体の解析:NK細胞の細胞傷害活性に影響を与える新規モノクローナル抗体の性状解析を行い、その抗体がマウスCD94を認識することを明らかにした。新規に得られた抗CD94抗体を用いて、CD94が全てのNKおよびNKT細胞に発現すること、NKおよびNKT細胞はCD94強陽性とCD94弱陽性細胞の2種類の細胞亜集団からなること、マウスCD94は標的細胞上のQa-1分子を認識して細胞傷害活性を抑制する、抑制性レセプターとして機能すること、マウスNK細胞の自己寛容にはCD94/NKG2ファミリーとLy-49ファミリーの2種類の抑制性レセプターからのシグナルが必須であることを明らかにした。(2)未熟NK細胞に発現するレセプターの検索:NK細胞の分化に関わるレセプターを明らかにすることを最終目的として、未熟NK細胞上のNKレセプターの検索を行った。未熟NK細胞を免疫し、モノクローナル抗体を作製し、発現分布、NK細胞に与える影響などからいくつかのモノクローナル抗体を選別した。(3)NKレセプターの一次構造上の相同性に基づくPCRクローニング:Ly-49ファミリーでよく保存されている配列をもとに、PCRクローニングを行い、新規Ly-49分子としてLy-49Qを同定した。Ly-49Qは細胞内領域にITIMモチーフを有し、ホモダイマーを形成して膜表面に発現しうることを示した。

The aim of this study is to explore new approaches to the identification of NK cell targets and to analyze the molecular structure of NK cells. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. (1)NK Analysis of CD94 antibody: Analysis of CD94 antibody properties in NK cells The new regulation results in the use of anti-CD94 antibodies, the expression of CD94 in all NK and NKT cells, and the inhibition of CD94-positive and CD94-weakly positive Qa-1 molecules on target cells. NK cell proliferation is the key to CD94/NKG2 inhibition. (2)The study of immature NK cell development: The final objective of this study is to study the development of immature NK cells. Immature NK cells are immune, immune. (3)NK The first structural identity of the Ly-49 molecule was determined by PCR. The Ly-49 molecule was determined by PCR. Ly-49Q is shown to exist in the intracellular field of ITIM and form on the surface of the membrane.

项目成果

Tagawa,K., et al.: "Myopathy phenotype of transgenic mice expressing active site-mutated inactive p94 skeletal muscle-specific calpain, the gene product responsible for limb girdle muscular dystrophy type 2A."Human Mol.Genet.. 9. 1393-1402 (2000)

Takawa,K. 等人：“表达活性位点突变的失活 p94 骨骼肌特异性钙蛋白酶的转基因小鼠的肌病表型，这是导致 2A 型肢带型肌营养不良症的基因产物。”Human Mol.Genet.. 9. 1393

反町典子: "NK細胞の標的認識とウイルスのエスケープ機構"実験医学 増刊号. (印刷中).

Noriko Sorimachi：“NK 细胞的目标识别和病毒逃逸机制”实验医学特刊（正在出版）。

Endo,J., et al.: "Deficiency of a STE20/PAK family kinase LOK leads to the acceleration of LFA-1 clustering and cell adhesion of activated lymphocytes."FEBS Letters. 468. 234-238 (2000)

Endo,J. 等人：“STE20/PAK 家族激酶 LOK 的缺陷会导致 LFA-1 聚集和活化淋巴细胞的细胞粘附加速。”FEBS Letters。

Toyama-Sorimachi,N., et al.: "Mouse CD94 participates in Qa-1-mediated self recognition by NK cells and delivers inhibitory signals independent of Ly-49."J.Immunol.. (In press).

Toyama-Sorimachi,N. 等人：“小鼠 CD94 参与 NK 细胞 Qa-1 介导的自我识别，并独立于 Ly-49 传递抑制信号。”J.Immunol..（正在出版）。

Yamaguchi, M.: "The effect of flow on the neutrophil-mediated Ca2+ responses in human vascular endothelial cells stimulated by endotoxin"Surgery Today. 29. 966-969 (1999)

Yamaguchi, M.：“流量对内毒素刺激的人血管内皮细胞中中性粒细胞介导的 Ca2 反应的影响”《今日外科》。