权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

HIVの感染前期過程をモニターする系の確立とその阻害宿主因子の探索

建立HIV感染早期监测系统并寻找抑制其宿主因素

基本信息

批准号：
13877047
负责人：
前田洋助
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877047/
关键词：
HIV ウイルス複製感染前期過程感染抵抗性阻害因子前期過程

项目摘要

昨年度確立したルシフェレース遺伝子をリポーターとして有するSelf-inactivating (SIN)-HIVを使用して、種々のヒト細胞株の感染前期過程におけるHIV感受性を調べた。その結果,ヒトT細胞株間でも感染前期過程において感受性に10倍以上の差があることが判明した。特に、HUT78細胞株においてそのHIV抵抗性は顕著であった。さらに本年度は末梢リンパ球においてもHIV感染に対する阻害が存在していることを確認し、このような感染抵抗性が広くヒト細胞に存在していることが示唆された。また、種々の感染前期過程をモニターすることが可能なPCRを使用してより詳細に検討したところ、主に逆転写レベルでその阻害がかかっていると結論された。さらに、個々の細胞レベルでのHIV感受性の差異を調べる目的で、本年度はリポーター遺伝子としてGFPを有するSIN-HIVを作製した。その結果、ルシフェレース遺伝子を有するHIVとほぼ同様にHIVに対しHUT78細胞が比較的耐性であることが判明した。また旧世界サル、特にアフリカミドリザル由来細胞株であるCV-1、B95a、Vero細胞株はHIV感染抵抗性細胞株であり、これらのヒト以外霊長類における感染抵抗性についても現在解析を進めているところである。このような結果をふまえて現在、細胞由来感染阻害因子の探索を行っている。HIV感受性細胞であるHOS細胞にヒトリンパ球由来cDNAライブラリーレトロウイルスを導入し、ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ(HSV-TK)をリポーターとして有するHIVを感染させ、ガンシクロビル存在下で培養し、HIV感染抵抗性細胞を樹立中であり、これらの細胞に導入されたcDNAを今後クローニングしていく予定である。

It was established last year that HIV susceptibility was modulated during the pre-infection process of HIV use and seed cell lines. As a result, T cell lines were more than 10-fold different in susceptibility during the pre-infection process. HUT78 cell lines are resistant to HIV. This year, we have identified the presence of HIV infection resistance in peripheral blood. The process of pre-infection is discussed in detail, and the resistance is discussed in detail. The aim of this year's study is to modulate differences in HIV susceptibility among individual cells and to control HIV infection through GFP. The results showed that HIV infection was similar to HIV infection in HUT78 cells. Cell lines derived from the old world, including CV-1, B95a and Vero cell lines, are resistant to HIV infection. The result of this study is to explore the present and cell-derived infection prevention factors. HIV-susceptible cells are cultured in the presence of HOS and HIV-resistant cells, and cDNA is introduced into HOS cells.