抗体アレイ法を応用した造血器腫瘍細胞におけるシグナル伝達因子異常の網羅的解析

抗体芯片法综合分析造血肿瘤细胞信号转导因子异常

• 批准号: 15659226
• 负责人: 三浦 修
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659226/
• 关键词: 造血器腫瘍; シグナル伝達; 白血病; 悪性リンパ腫; STAT5; Jak2; Lyn; チロシンリン酸化

細胞内シグナル伝達機構においてチロシンリン酸化は、チロシンキナーゼの活性化やその基質蛋白質のリン酸化によるシグナル伝達経路の活性化を意味する事から、造血器腫瘍(各種白血病、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫等)の患者検体(末梢血、骨髄穿刺液、リンパ節生検材料等)を採取し、単核細胞分画の細胞抽出液を調整し、抗体アレイ法を応用して網羅的にシグナル伝達関連蛋白質のチロシンリン酸化を多数の症例や解析するための実験条件を設定する目的で、まず抗リン酸化チロシン抗体(4G10)およびJak2・STAT3・STAT5・Erk・CrkL・Lyn等の種々のシグナル伝達因子のリン酸化特異的抗体を用いてWesternブロット法による解析を施行した。これらの解析により、数例の急性骨髄性白血病症例においてSTAT5のチロシンリン酸化を、また、急性リンパ性白血病の1症例においてLynの強いチロシンリン酸化とRasGAPとの結合を見いだし、in vitro kinase assayによりLynの強い活性増強を認めた。さらに、慢性骨髄性白血病症例ではBCR/ABLの自己リン酸化を確認すると供に、下流のSTAT5やCrkLのチロシンリン酸化の亢進とSTI571処理による抑制を認めた。これらの結果をコントロールとして用いることで、抗体アレイ法を応用した網羅的シグナル伝達関連蛋白質のチロシンリン酸化検出法の条件を設定し、シグナル伝達因子や経路の活性化のパターンと、疾患の病態分類・治療反応性・予後との相関に関してもデータを蓄積して関連を明らかにするため症例の蓄積中である。

The detection of intracellular DNA in the body of the patient (peripheral blood, bone puncture fluid, raw material, etc.) means that the activation of the gene protein, the activation of the protein, the activation of the protein, Nuclear cell drawing, cell extraction, cell extraction, antibody detection, protein extraction, protein acidification, protein extraction, cell extraction, antibody extraction, antibody assay, protein purification, protein purification, acidification, most cases, diagnosis, diagnosis, The anti-acidified antibody (4G10) was tested against Jak2 ·STAT3 ·STAT5 ·Erk ·CrkL ·Lyn and other specific antibodies. The specific antibodies were analyzed and analyzed by Western assay. Several cases of acute osteoblastic leukemia, several cases of acute osteoblastic leukemia, one case of acute osteoblastic leukemia, one case of acute myeloid leukemia, one case of acute osteoblastic leukemia, one case of acute osteoblastic leukemia, one case of acute myeloid leukemia, one case of acute osteoblastic leukemia, one case of acute myeloid leukemia, one case of acute osteoblastic leukemia, one case of acute myeloid leukemia, one case of acute myeloid leukemia, one case of acute osteoblastic leukemia, one case of acute myeloid leukemia, one case of acute osteoblastic leukemia Cases of chronic osteoblastic leukemia, such as BCR/ABL, self-acidification, confirming supply, indecent, STAT5, CrkL, acidification, hyperacidification, inhibition, recognition. The result of this experiment is to use the Internet protocol, antibody assay, Internet access protocol, network protocol, protein protocol, acidification protocol, acidification protocol, activation factor, and so on. After the disease is classified and treated according to different types of disease, the disease will be treated according to the classification and treatment of the disease.

项目成果

Morita Y, Takahashi A, Yamamoto K, Miki T, Murakami N, Miura O.: "Secondary near-tetraploidy with double der(15)t(15;17) in acute promyelocytic leukemia in relapse."Cancer Genet Cytogenet. 149. 131-136 (2004)

Morita Y、Takahashi A、Yamamoto K、Miki T、Murakami N、Miura O.：“复发性急性早幼粒细胞白血病中具有双 der(15)t(15;17) 的次级近四倍体。”癌症基因细胞遗传学。

Yamamoto K, Yamaguchi M, Miyasaka N, Miura O.: "SOCS-3 inhibits IL-12-induced STAT4 activation by binding through its SH2 domain to the STAT4 docking site in the IL-12 receptor b2 subunit."Biochem Biophys Res Commun. 310. 1188-1193 (2003)

Yamamoto K、Yamaguchi M、Miyasaka N、Miura O.：“SOCS-3 通过其 SH2 结构域与 IL-12 受体 b2 亚基中的 STAT4 对接位点结合，抑制 IL-12 诱导的 STAT4 激活。”Biochem Biophys Res Commun

Kanda E, Jin ZH, Mizuchi D, Arai A, Miura O.: "Activation of Rac and tyrosine phosphorylation of cytokine receptors induced by cross-linking of integrin alpha4betal and cell adhesion in hematopoietic cells."Biochem Biophys Res Commun. 301. 934-940 (2003)

Kanda E、Jin ZH、Mizuchi D、Arai A、Miura O.：“整联蛋白 α4β 交联诱导的细胞因子受体 Rac 和酪氨酸磷酸化的激活以及造血细胞中的细胞粘附。”Biochem Biophys Res Commun。