造血細胞における細胞接着・増殖・細胞死調節のシグナル伝達統合機構の解析

造血细胞中调节细胞粘附、增殖和细胞死亡的整合信号转导机制分析

基本信息

批准号：
12036208
负责人：
三浦修
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12036208/
关键词：
エリスロポエチンインテグリン CrkL シグナル伝達 Rap1 C3G

项目摘要

造血因子受容体から、アダプター因子CrkLやRasファミリーのGTP結合蛋白Krev1/Rap1を介して、インテグリンの活性化に至るシグナル伝達機構を、造血細胞において解析し以下の結果を得た。赤芽球系造血細胞の増殖と分化を調節するエリスロポエチン(Epo)の受容体は、CrkLおよびCrkLと結合するRasファミリーのGEFであるC3Gとを介して、Ras/MAPキナーゼ経路の活性化とともに、β1インテグリンを介して造血細胞の細胞接着の亢進をもたらすことを、私達はこれまでに示してきた。今回の研究では、C3Gにより活性化される事が知られているRap1に関して検討を行い、EpoやIL-3の刺激によりRap1が造血細胞内で一過性に活性化されることを見出した。サイトカインによるRap1の活性化は、CrkLやC3Gを誘導的に過剰発現することで増強され、これらの因子がサイトカイン受容体によるRap1活性化に関与していることが示唆された。また、Rap1はTPAやCa ionophoreによっても活性化され、一方PLCγの阻害剤により抑制されたことより、サイトカインによるPLCγの活性化も2次メッセンジャーを介してRap1の活性化に関与していることが示唆された。また、Rap1の活性化はβ1インテグリンを介した造血細胞の細胞接着と相関し、活性化型Rap1の発現によりβ1の活性化が認められた。以上の結果より、EpoやIL-3受容体はCrkL/C3GやPLCγを介してRap1を活性化することにより、β1インテグリンを介した細胞接着を誘導することが明らかにされた(Arai,A.et al.,J Biol Chem,in press)。

通过衔接因子CRKL和RAS家族GTP结合蛋白KREV1/RAP1在造血细胞中分析了从造血因子受体激活整合素的信号转导机制，并在造血细胞中分析了以下结果。到目前为止，我们已经显示出促红细胞生成素（EPO）受体，这些受体调节了红细胞造血细胞的增殖和分化，导致通过C3G通过C3G的RAS家族GEF（一种结合CRKL和CRKL的RAS家族）通过RAS/MAP KINASE路径的激活而增加的RAS家族，导致造血细胞的细胞粘附增加，并增加整合素。在这项研究中，我们研究了RAP1，该RAP1被C3G激活，发现Rap1通过刺激EPO或IL-3在造血细胞中瞬时激活。 CRKL和C3G的诱导过表达增强了细胞因子诱导的RAP1激活，这表明这些因素与细胞因子受体有关RAP1激活。此外，TPA和CA离子载体还激活了RAP1，同时抑制PLCγ抑制剂，这表明细胞因子还通过二级信使在PLCγ激活中起作用。此外，RAP1激活与造血细胞的细胞粘附通过β1整合素相关，并且由于活化的RAP1的表达而观察到β1活化。这些结果表明，EPO和IL-3受体通过通过CRKL/C3G和PLCγ激活RAP1诱导细胞粘附（Arai，A。et al。，J Biol Chem，in Press中）。