エリスロポエチン受容体からのチロシンキナーゼを介したシグナル伝達機構の解析

酪氨酸激酶介导的促红细胞生成素受体信号转导机制分析

基本信息

批准号：
10181207
负责人：
三浦修
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10181207/
关键词：
エリスロポエチンインターロイキン3 受容体 Jak2 STAT5 Lyn CrkL

项目摘要

赤芽球系造血細胞の増殖と分化を調節するエリスロポエチン(Epo)の受容体は,JAK2等のチロシンキナーゼの活性化を介してSTAT5やRas/MAPキナーゼ経路の活性化をもたらすことが明らかにされてきたが,JAK2以外のチロシンキナーゼとしてSrcファミリーのLynにつき検討を行い,このチロシンキナーゼがSH2領域等を介して細胞内でEpo受容体と結合し,Epo受容体自身やSTAT5のチロシンリン酸化を誘導し,さらにはSTAT5のDNAへの結合やその標的遺伝子の転写の活性化をも誘導しうることを示した(Chin H.et al,Blood 91:3734-3745,1998)。また,Epo受容体によりチロシンリン酸かを受ける事を以前に報告したCrkLに関して検討を行い,CrkLはEpo等のサイト力イン受容体によるRas・Raf-1・MEX・Erk経路を介してElk-1の活性化とc-fos遺伝子の発現誘導に至るシグナル伝達経路の活性化に関与しうることを見出した。この経路の活性化は,CrkLのSH2領域およびC3Gとの結合に必要なN末端側SH3領域のみが関与し,cdc25領域を欠失したC3Gにより抑制された事より,CrkL/C3G複合体がCrkLのSH2領域を介して活性化されたサイトカイン受容体複合体に結合することで細胞膜に動員されることによるものと考えられる(Nosaka Y.et al,submitted for publication)。さらに,CrkLの機能に付き検討を行い,CrkLの過剰発現にてVLA-4およびVLA-5を介したFibronectinへの細胞接着が亢進することを見出した。細胞接着の亢進はCrkLに結合したC3GのGEF活性を介して生じることが,C3Gとの結合に必要なSH3領域を欠失したCrkLや,cdc25領域を欠失したC3Gの発現により,細胞接着が抑制されることより示された。以上の結果より,CrkLはC3Gを介して,Ras/MAPキナーゼ経路とは別のシグナル伝達系路を活性化し,インテグリンの活性化による細胞接着亢進をもたらすことが示唆された(Arai A.et al,Blood,inpress)。

已经表明，调节红细胞造血细胞的增殖和分化的促红细胞生成素（EPO）可以通过激活JAK2等酪氨酸激酶的激活来激活STAT5和RAS/MAP激酶途径。我们已经研究了LYN的SRC家族作为JAK2以外的酪氨酸激酶，并表明该酪氨酸激酶通过SH2区域与细胞中的EPO受体结合，诱导EPO受体本身和STAT5的酪氨酸磷酸化，并且可以诱导Stat5与DNA的dna和其目标基因的转录（H.）的结合（也可以） 91：3734-3745，1998）。我们还研究了CRKL，该CRKL先前报道说是通过EPO受体磷酸酪氨酸，发现CRKL可能参与ELK-1的激活以及信号传导途径的激活，从而导致诸如EPO等受体中的胞源诱导C-FOS基因的表达。 Activation of this pathway is thought to be due to the fact that only the N-terminal SH3 region required for binding to CrkL and the N-terminal SH3 region, which is required for binding to C3G, was inhibited by C3G, which had the cdc25 region deleted, and that the CrkL/C3G complex was recruited to the cell membrane by binding to the activated cytokine receptor complex via the SH2 region of CrkL （Nosaka Y.等人，提交出版）。此外，我们研究了CRKL的功能，发现CRKL通过VLA-4和VLA-5的过表达增强了细胞粘附于纤连蛋白。已经表明，通过与CRKL结合的C3G的GEF活性增加了细胞粘附，并且通过CRKL的表达抑制细胞粘附，这已删除了与C3G和C3G结合所必需的SH3区域，该区域已删除了CDC25区域。这些结果表明，CRKL激活了通过C3G通过RAS/MAP激酶途径分离的信号转导途径，从而导致整合素激活引起的细胞粘附增加（Arai A.等，血液，Inpress）。