白血病におけるJAK2・STAT5恒常的活性化の診断法開発と制御法へ向けての検討

白血病 JAK2/STAT5 组成型激活的诊断方法和控制方法的开发

• 批准号: 11140222
• 负责人: 三浦 修
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140222/
• 关键词: エリスロポエチン; インターロイキン3; 受容体; Jak2; Stat5; Lyn; CrkL

白血病細胞の増殖機構を解明しその制御法を開発する目的にて,種々の白血病症例および得られた白血病細胞株においてJAK2およびSTAT5の恒常的活性化と,STAT経路および関連した細胞内シグナル伝達経路の異常につき検討を行い下記の結果を得た.急性リンパ球性白血病および急性骨髄球性白血病患者より樹立された細胞株;それぞれTMD-5およびTMD-7においてSTAT5の恒常的活性化が認められた.より詳細な検討により,TMD-5およびTMD-7におけるSTAT5の恒常的活性化は,STAT5自体の変異やJAK2の異常活性化によるものではなく,それぞれPh1染色体転座によるp190BCR/Ablの発現およびSrcファミリーチロシンキナーゼLynの過剰発現と活性化によることが結論された。また,このことに一致し,TMD-7の細胞増殖はJAK2の阻害因子AG490ではほとんど影響を受けず,Srcファミリーの阻害因子PP-1にて強く抑制を受けることが見出された.TMD-7におけるLynの異常活性化に関しては現在遺伝子・蛋白のレベルにて原因を検討中である.さらに,STAT5の恒常的活性化を認めた2例においては,細胞内アダプター因子CrkLにも恒常的チロシンリン酸化が認められ,両者が細胞内にて複合体を形成していることが見出された.そこで,CrkLの造血細胞内における機能をマウスの造血細胞株32Dにて検討し,CrkLがRas/MAPキナーゼ経路の活性化およびインテグリンを介した細胞接着の調節に重要な役割を果たすことを見出した.また,上記の細胞を含め検討した白血病細胞の多くはインターフエロンα(IFNα)刺激により,従来より報告されているSTATl・STAT2・STAT3以外にSTAT5やSTAT6の活性化をも高頻度にもたらすことを見出した.これらの白血病細胞ではIFNα処理により増殖も抑制されることが見出された。

The leukemic cell colonization mechanism explains that there is a method for the treatment of leukemia. in the case of leukemia, the leukemic cell line has the constant activity of STAT5 in the cell line of leukemia, and the cell strain of JAK2 has been activated constantly. the results of STAT test have been successful. Acute myeloid leukemia, acute osteoblastic leukemia, acute osteoblastic leukemia, acute osteob Because of the constant activation of STAT5 in TMD-5, STAT5 autologous JAK2 is always active, and Ph1 chromosomal locus is sensitive to p190BCR/Abl. The results show that Src is sensitive to Lyn, and the results of Lyn analysis show that activation is not possible. The cell proliferation of JAK2, AG490, PP-1, Src, Src, PP-1, Lyn, TMD-7, TMD-7, T The activation of STAT5 was constant in 2 cases, the intracellular factor CrkL was constant, the intracellular complex was formed, and the intracellular complex was formed. The hematopoietic cell line 32D was activated by CrkL. The hematopoietic cell line 32D was activated by CrkL. The cell was then introduced into the host cell and the important cell was cut. In addition to the activation of STAT5 STAT6 other than STATl ·STAT2 ·STAT3, it is necessary to report that there is a high degree of activation of leukemic cells. The leukemic cells were treated with IFN α. The colonization was suppressed by the growth of leukemic cells.

项目成果

Arai, A., Nosaka, Y., Kohsaka, H., Miyasaka, N., and Miura, O.: "CrkL activities integrin-mediated hematopoietic cell adhesion through the guanine nucleotide exchange factor C3G"Blood. 93. 3713-3722 (1999)

Arai, A.、Nosaka, Y.、Kohsaka, H.、Miyasaka, N. 和 Miura, O.：“CrkL 通过鸟嘌呤核苷酸交换因子 C3G 激活整合素介导的造血细胞粘附”血液。

Yamamoto, K., Shibata, F., Miura, O., Kamiyama, R., Hirosawa, S., and Miyasaka, N.: "Physical interaction between interleikin-12 receptor beta 2 subunit and Jak2 tyrosine kinase : Jak2 associates with cytoplasmic membrane proximal region of interleukin-12

Yamamoto, K.、Shibata, F.、Miura, O.、Kamiyama, R.、Hirosawa, S. 和 Miyasaka, N.：“interleikin-12 受体 β 2 亚基和 Jak2 酪氨酸激酶之间的物理相互作用：Jak2 与

Nosaka, Y., Arai, A., Miyasaka, N., and Miura, O.: "CrkL mediates Ras-dependent activation of the Raf/ERK pathways through the guanine nucleotide exchange factor C3G in hematopoietic stimulated with erythropoietin or interleukin-3"J. Biol. Chem.. 274. 301

Nosaka, Y.、Arai, A.、Miyasaka, N. 和 Miura, O.：“在促红细胞生成素或白细胞介素 3 刺激的造血过程中，CrkL 通过鸟嘌呤核苷酸交换因子 C3G 介导 Ras 依赖性激活 Raf/ERK 通路

Chida, D., Miura, O., Yoshimura, A., and Miyasaka, A.: "Role of cytokine signaling molecules in erythroid differentiation of mouse fetal liver hematopoietic cells : functional analysis of signaling molecules by retrovirus-mediated expression"Blood. 93. 15

Chida, D.、Miura, O.、Yoshimura, A. 和 Miyasaka, A.：“细胞因子信号分子在小鼠胎肝造血细胞红系分化中的作用：通过逆转录病毒介导的表达对信号分子进行功能分析”血液。