ラミニン^α鎖G領域の脂肪内在幹細胞保育因子としての機能

层粘连蛋白^α链G区作为脂肪干细胞培育因子的功能

• 批准号: 17658049
• 负责人: 北川 泰雄
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17658049/
• 关键词: 幹細胞; 幹細胞保育因子; 再生医療; 組織再建; シンデカン; 脂肪; ラミニン; G領域

脂肪組織は、間葉系、内皮、肝、膵、視神経に分化できる幹細胞を多量に含んでいる。これを移植すると、頭蓋欠損が再建され、虚血心臓や骨格筋の症状が改善する。では、「何故、脂肪に幹細胞が集まるのでろうか?」また、「何故、脂肪の幹細胞は暴走しないのであろうか?我々は、i」成熟脂肪細胞の天井培養系をコマ撮りビデオ撮影して、幹細胞が成熟脂肪細胞に引き寄せられて表面を遊走している顕微鏡像を捉えた.ii」3T3-L1脂肪細胞が分化に伴って分泌するラミニン-8(α4β1γ1)の構成鎖のα4鎖のG領域が生体内で切断されることを確認した。iii」可溶化基底膜(Matrigel)とFGF-2をマウスに皮下注射して脂肪新生を誘発する系にα4鎖G領域断片を添加すると脂肪新生が抑制されることも発見した。iv」α4鎖G領域が強いヘパリン結合活性を持ち、細胞表面のシンデカンを介して細胞接着力を生み出すことも示した。これらの知見を総合し、体内随所にあるラミニンのα鎖G領域が切断され、これが幹細胞表面のシンデカンに結合してFGF-2等のヘパリン結合性増殖因子のシグナルを遮断して幹細胞の増殖・分化を抑制している可能性を以下の解析で検討した。1)脂肪組織から分離した幹細胞は、フィブロネクチン被覆した培養皿上で、2%のウシ胎児血清とFGF-2を含む培地中で増殖する。しかし、ラミニンα4鎖G領域断片で被覆すると増殖は抑制された。すなわち、FGf-2の増殖シグナルがシンデカンに結合するα4鎖のG領域で遮断されることが示された。2)脂肪組織から採取したばかりの幹細胞は血球系幹細胞や内皮幹細胞マーカーであるCD34陽性であるが、成熟脂肪細胞から離れて増殖をはじめるとCD34陰性になる。ところが、このCD34陽性形質は脂肪細胞上で重層培養すると維持されるた。すなわち、成熟脂肪細胞表面に幹細胞の分化を抑制する因子があることが示唆された。この因子がラミニンであることを特異抗体添加実験などで確かめようとしたが、今のところ結論を得るには至っていない。

Adipose tissue で, mesenchymal, endothelial, liver, 膵, and optic nerve に differentiate into で る る stem cells を in large quantities に containing んで る る る. <s:1> れを transplantation すると, reconstruction of the damaged skull が され, and improvement of symptoms of the bone, tendon and bone in the heart with deficient blood や する. Youdaoplaceholder0 で, "Why, adipose-derived に stem cells が set まる まる でろう でろう でろう でろう でろう?" の ま た, "somehow, fat cells は outbreak し な い の で あ ろ う か? I 々 は, I" mature fat cells の patio training department を コ マ pinch of り ビ デ オ pinch of shadow し て が mature fat cells, stem cells lead に き send せ ら れ て surface を wander し て い る 顕 micro mirror を catch え た. Ii 3 t3 - L1 fat cells が に with っ て secretion す る ラ ミ ニ The <s:1> -8(α4β1γ1) <s:1> constitutes the lock of the <s:1> α4 lock of the <s:1> G domain が in vivo で cut off the される とを とを confirm the <s:1> た. Iii "solubilization basement membrane (Matrigel と FGF) - 2 を マ ウ ス に subcutaneously し て fat を 発 lure new す る system lock に alpha 4 G area fragment を add す る と freshman が inhibit fat さ れ る こ と も 発 see し た. Iv "alpha 4 G lock field strong が い ヘ パ リ ン binding activity を hold ち, cell surface の シ ン デ カ ン を interface し て born by cell emphatically を み out す こ と も shown し た. こ れ ら の knowledge を 総 し, along with the in vivo に あ る ラ ミ ニ ン の alpha lock G が cut さ れ, こ れ が stem cell surface の シ ン デ カ ン に combining し て FGF - 2 の ヘ パ リ ン associativity raised colonization factor の シ グ ナ ル を interrupt し て の raised colonization, differentiated を inhibit し て い る possibility を の parsing で beg し 検 た. 1) adipose tissue か ら separation し は た stem cells, フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン coating し た で on petri dishes, 2% の ウ シ fetal serum と FGF - 2 where を containing む で raised in petty colonization す る. <s:1> すると, ラ, ラ, ニ, <s:1>, α 4-lock g-domain fragment で coating すると, expansion inhibition された. す な わ ち, FGf - 2 の raised colonization シ グ ナ ル が シ ン デ カ ン に combining す る alpha 4 lock の G で interrupt さ れ る こ と が shown さ れ た. 2) adipose tissue か ら take し た ば か り の は blood stem cells is a stem cell や endothelial cells マ ー カ ー で あ る CD34 positive で あ る が, mature fat cells か ら from れ て raised colonization を は じ め る と CD34 negative に な る. Youdaoplaceholder0 と ろが ろが, <s:1> cd34-positive plasmoid <s:1> adipocytes で double-layer culture すると maintenance されるた. Youdaoplaceholder0, に stem cell <s:1> differentiation を inhibitory factor する on the surface of mature adipocytes がある とが suggesting された. こ の factor が ラ ミ ニ ン で あ る こ と を specific antibodies to add be 験 な ど で か indeed め よ う と し た が, today の と こ ろ conclusion を must る に は to っ て い な い.

项目成果

Differential effect of green tea catechins on three endothelial cell clones isolated from rat adipose tissue and on human umbilical vein endothelial cells.

绿茶儿茶素对从大鼠脂肪组织中分离的三种内皮细胞克隆和人脐静脉内皮细胞的差异作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Cytotechmology 46・1
• 作者: Koparal;Tansu A.;et al.
• 通讯作者: et al.

低血清培地で選択的に増殖する動物組織遍在性の多分化性細胞

多能细胞普遍存在于动物组织中，可在低血清培养基中选择性生长

• 发表时间: 2005

Isolation of two human fibroblastic cell populations with multiple but distinct potential of mesenchymal dilerentiation by ceiling culture of mature fat cells from subcutaneous adipose tssue.

通过对来自皮下脂肪组织的成熟脂肪细胞进行天花板培养，分离出具有多种但不同的间充质分化潜能的两种人类成纤维细胞群。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Differentiation 73・2-3
• 作者: Miyazaki T;Kitagawa Y;Toriyama F;Kobori M;Torii S.
• 通讯作者: Torii S.

脂肪組織からの体性幹細胞の分離

从脂肪组织中分离成体干细胞

• 发表时间: 2006
• 期刊: The Lipid 17・1
• 作者: 北川泰雄;他
• 通讯作者: 他